8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 1/67
ENZIMEPLASMATICE
Conf. CSII Dr. Cristiana TANASE
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 2/67
• Catalizatori ai reactiilor chimice care au loc inorganismele vii
• Determinarea activitatii enzimelor plasmatice,precum si a concentratiei diferitelor sustrateprezinta importanta clinica ! acesti parametriiiochimici re"ecta modi#cari aparute la nivel tisularin diverse organe
• Enzimologia clinica permite astfel$
! un diagnostic pozitiv si diferential corect
! monitorizarea evolutiei unor oli si a e#cientei terapiei
! identi#carea unor defecte enetice si a consecintelor
EN%I&E '(AS&ATICEConsideratii generale
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 3/67
C(ASI)ICA*EA EN%I&E(+*
'(AS&ATICESe realizeaza in functie de localizarea substratului
• Enzime functionale - specice plasmei
• Secretate activ in plasma mai ales de catre #cat
• Actioneaza in mod normal in plasma
• Sunt decelate in concentratii relativ mari dar constante
• Eemple$ ceruloplasmina, lipoproteinlipaza, enzimelecare intervin in procesele de coagulare si #rinoliza
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 4/67
• -. Enzime nefunctionale ! nespeciceplasmei
- Concentratii plasmatice foarte mici a/ung in
plasma ca urmare a turnoverului celular
Aceste enzime se suclasi#ca in$
a" Enzime de e#cretie
b" Enzime celulare
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 5/67
a" Enzime secretate de glande e#ocrine care
difuzeaza pasi$ in sange
•Nu eercita rol in plasma
•Nivelul lor scade in caz de atro#e glandulara
•Nivelul lor creste in caz de ostructie a glandelorecretoare sau in caz de crestere a permeailitatiimemranelor celulare
•Eemple$ amilaza, lipaza si tripsina pancreatica,pepsinogenul gastric, fosfataza alcalina de origine iliarasi fosfataza acida prostatica
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 6/67
b" Enzime celulare
•'rovin din celulele diferitelor organe0 actioneaza eclusivintracelular0 nu prezinta sustrat de reactie si cofactori inplasma
•Se gasesc in plasma in cantitati mici si cresc in situatiipatologice ca urmare a distructiei celulare
•Determinarea activitatii lor in ser re"ecta un anummit tip de1spectru enzimatic1 al organului afectat
•Eemple$ transaminazele, creatinfosfo2inaza, lactatdehidorgenaza
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 7/67
• Eista 3 clase de enzime in functie de tipul reactieicatalizate$
! oido!reductaze
! transferaze
! hidrolaze
! liaze
! izomeraze
! ligaze
Clasi#carea enzimelor
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 8/67
I%+EN%I&E
• )orme moleculare multiple ale unei enzime care se gasesc indiverse tesuturi
• Toate izoenzimele unei enzime catalizeaza aceeasi reactie ! diferadoar viteza de reactie
• Eemple$
! creatinfosfo2inaza ! 4 izoenzime,
! lactat dehidrogenaza ! 5 izoenzime,
! fosfataza alcalina ! 4 izoenzime principale
! amilaza 6 izoenzime principale
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 9/67
ANTIEN%I&E 7ANTI'*+TEA%E8
•
'roteine reglatoare care inhia activitatea enzimelor proteoliticeprovenite din zimogeni
• Serpinele ! inhiitori de serin proteaze0 din familia serpinelor facparte$
•
Antitromina• 9:!antitripsina
• Inhiitorul pancreatic al tripsinei
• Inhiitorul proteinei C
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 10/67
Cauzele aparitiei enzimelor in
plasmaA. Necroza tisulara afectari celulare severe cu modi#cariale permeailitatii memranelor cauzate de ischemie,sustante toice, agresori iologici virus, acterie, etc
! Cantitatea de enzime direct proportionala cu gravitateaafectarii si marimea zonei afectate
-. Metabolismul %multiplicare celulara intensa
! 'erioade de crestere activa$ primul an de viata, puertate !
fosfataza alcalina
! 'rocese de reparare tisulara 7postfracturi8 ! fosfatazaalcalina
! Asociere procese maligne ! fosfataza alcalina
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 11/67
C. Inductie enzimatica&
sinteza indusa de medicamente, staripatologice gama glutamiltranspeptidaza
alcool, medicamente antiepileptice,contraceptive orale, etc
D. 'bstructia de duct e#cretor&
enzimele secretiilor eocrine ! amilaza
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 12/67
)actori care in"uenteaza nivelulenzimelor plasmatice
• ;iteza elierare a enzimei din tesuturi0
• *ata de eliminare a enzimelor plasmatice princataolism sau ecretie,
• ;olumul de distriutie in "uidul etracelular
• Alti factori$ activatori sau inhiitori enzimatici dinplasma
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 13/67
T*ANSA&INA%E(E• Enzime implicate in mataolizarea aminoacizilor0
• Au drept coenzima piridoal!5!fosfat derivat din vitanima-30 in de#citul de -3 reactia de transaminare scade,precum si activitatea plasmatica a enzimei
• Transaminazele serice acţioneazǎ la nivel intracelular, catalizândreacţia de transfer a unei grupǎri amino (-NH2) de la un -aminoacid la un -cetoacid!
• "#istǎ douǎ transaminaze serice cu aplicaţii clinice importante$
a) %&%N'N%'NT*%N+"*%% (T./0%&%T0%&T)
1) %+/%*T%T%'NT*%N+"*%% (T.0%+%T0%+T)
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 14/67
A(ANINA&IN+T*ANS)E*A%A
7T<'=A(AT=A(T8Consideratii generale
• A(T 7transaminaza glutampiruvica ! T<'8 ! enzima ce
face parte din clasa transferazelor si catalizeaz>transferul grup>rii amino 7!N?68 de la (!alanin> laacidul 9!cetoglutaric, rezult@nd acidul piruvic i acidul(!glutamic
• Se gaseste in principal in #cat 7la nivelul celuleihepatice !citosol8 si in ordine descrescatoare aconcentratiei in rinichi, miocard, muschi scheletici sipancreas.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 15/67
Semni#catie clinica
- indicator de citoliza cel mai frecvent eplorat
- A(T este mai speci#ca pentru afectiunile hepatice decat
AST
- sunt necesare determinari in dinamica
- valori de referinta$ adulti B ! 43 =(0 varstnici$ crescute
*ecomandari pentru determinarea A(T
• diagnosticul olilor hepatice
• diagnosticul diferential al olilor hepatoiliare si
pancreatice
• monitorizarea evolutiei si a tratamentului hepatitei virale
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 16/67
Semni#catie clinica•;alori crescute$
! ?epatite acute virale si toice 7cele mai mari valori, de 6
: ori valoarea normala8
! ?epatite cronice 7de 5 : ori valoarea normala8 si ciroza
hepatica 7de : 5 ori valoarea normala8
! Ictere ostructive 7cresterile pot # mici si tardive8
! &etastaze hepatice si hepatom 7cresteri usoare =
moderate8
! Steatoza hepatica 7cresteri de 6!4 ori normalul8
•;alori scazute$
! infectii urinare, neoplazii, de#cit de piridoal fosfat
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 17/67
AS'A*TATA&IN+T*ANS)E*A%A7T<+=ASAT=AST8
Consideratii generale• AST ! catalizeaz> transferul grup>rii amino de la acidul
(!aspartic la acidul 9!cetoglutaric rezult@nd acidul
oalilacetic i acidul (!glutamic• Spre deoseire de A(T care se gaseste in principal la
nivelul #catului, AST este intalnita in mai multe tesuturi$miocard, #cat, muschi scheletici, rinichi, pancreas, tesut
cereral, splina, #ind astfel un indicator mai putinspeci#c al functiei hepatice.
• (a nivelul celulei hepatice, izoenzimele AST se gasescatat in citosol, cat si in mitocondrii
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 18/67
Semni#catie clinica
- ;alorile AST cresc in aproape toate hepatopatiile precum
si in numeroase afectiuni etrahepatice, cu precadere ininfarctul miocardic si in maladii ale muschiului striat.
- ;alori de referinta$
! arati$ 6 B =(0
! femei$ : 4 =(.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 19/67
Semni#catie clinica
•;alori crescute$!?epatite acute virale si toice 7cele mai mari valori,de : : ori valoarea normala8-Infarctul miocardic acut, stari septice, interventii pecord, traumatisme hepatice, metastaze hepatice,radomioliza 7cresteri marcate uneori peste 4=(8-Ictere ostructive 7cresteri si scaderi rapide8-hepatita acuta virala, hepatopatii cronice 7hepatita
cronica activa, ciroza8, hepatita alcoolica 7valori maiputin crescute8
•;alori scazute$
-azotemie0 dializa renala cronica0 de#cit cronic de
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 20/67
*aportul de *itis
7*D*8• *aportul dintre activitatea T<+ 7AST8=T<' 7A(T8
• ;alori de referinta$ ,!:,B
• ;alori patologice$
! ()( crescut 7in necroza se eliereaza enzimemitocondriale=T<+8$ I&A, hepatita alcolica, cirozasau neoplasm hepatic, colestaza intrahepatica, etc
! ()( scazut$ oli in"amatorii crestereapermeailitatii celulare, elierare de enzimecitoplasmatice0 hepatite infectioase, alte afectiuniin"amatorii.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 21/67
• ?idrolaza 7ortofosfomonoesterfosfohidrolaza8,cu trei forme izoenzimatice principale$
- ?epatoiliara 74!5F8
- +soasa 75!F8
- Intestinala 7!6F8
la care se adauga in timpul sarcinii o formatranzitorie 7forma placentara8.
! 'rin metode iochimice se poate face
diferentierea intre izoenzime.
)+S)ATA%A A(CA(INA 7A('8C+NSIDE*ATII <ENE*A(E
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 22/67
• eterminarea fosfatazei alcaline este folosita pentrudiagnosticul diferential al 1olilor 3epatice, in afectiunile
osoase, in 3iperparatiroidism!
• 'n tumorile de diverse etiologii fosfataza alcalina arevaloare de mar4er tumoral (depistarea metastazelor
3epatice sau osoase)!
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 23/67
C*ESTE*I A(E ACTI;ITATII A('+ patologie ,epatica$ cele mai marcate cresteri se
intalnesc in ostructia mecanica a cailor iliareetrahepatice sau in colestaza intrahepatica$ cancerde cap de pancreas, litiaza coledociana, hepatitacolestatica medicamentoasa 7cresteri de : ori80
ciroza iliara primitiva, carcinoame hepatice primaresau metastatice 7cresteri de 5!6 ori80 hepatitavirala 7crestere de 6 ori80
+ mononucleoza infectioasa si infectia cucitomegalovirus cresteri de pana la 5 ori normalul0
+ bolile ,epatice de cauza inltrati$a 7sarcoidoza,
tuerculoza, amiloidoza, acese8.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 24/67
+ Cresteri ! origine osoasa$ hiperparatiroidism0
hipertiroidism0 oala 'aget0 metastaze osoase0tumori osoase0 osteomalacie, rahitism0 inevolutia fracturilor multiple.
+ In sarcina saptamanile :3!6 ale unei sarcininormale, nivelul maim 7de 6 ori normalul8 ladeutul travaliului.
+ Afectiuni de origine intestinala$ in diverse
afectiuni ulcerative ale tractuluigastrointestinal, malasortie severa, infarctintestinal.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 25/67
SCADE*I A(E ACTI;ITATII A('
+ hipofosfatemie
+ hipotiroidism, cretinism0
+ malnutritie0
+ de#cit de zinc0
+ de#cit de magneziu0
+ femeile a"ate in post menopauza cu osteoporoza care
urmeaza tratament estrogenic sustitutiv
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 26/67
)+S)ATA%E(E ACIDE C+NSIDE*ATII <ENE*A(E
• enzime larg raspandite in tesuturi, intalnite la nivelosos, hepatic, splenic, renal, in eritrocite sitromocite.
• importanta diagnostica in special in cazulfosfatazei acide de la ni$elul prostatei, undeactivitatea enzimatica este de : ori mai mare
decat in celelalte tesuturi.• fosfataza acida este de asemenea prezenta in
concentratii crescute in lichidul seminal.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 27/67
SE&NI)ICATIE C(INICA
! utile in diagnosticul si monitorizarea cancerului de
prostata metastatic0 evaluarea unei posiile histiocitoze
- ;alori de referinta$
! arati$ H 3,3 =(0
! femei$ H 3,5 =(
alori crescute$
-
tumori de prostata cu metastaze 7in special osoase8.- valori moderat crescute$ metastaze osoase 7de origine
non!prostatica8, leucemia granulocitara, oala 'aget
avansata, hiperparatiroidism, oala <aucher si oala
!
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 28/67
• Antigenul speci#c prostatic 7'SA8 este utilizat maimult in screeningul cancerul de prostata.
• ;alori de referinta$ HB ng=m(
• 'SA are sensiilitate mai una ! apare in stadiiletimpurii dozare facila.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 29/67
A&I(A%A SE*ICAC+NSIDE*ATII <ENE*A(E
• face parte din categoria hidrolazelor, sugrupa de enzime carecatalizeaza degradarea hidrolitica a amidonului, a glicogenului, apoli! si oligozaharidelor.
• enzima de secretie eocrina, prezenta in ser su doua formeizoenzimatice principale$ pancreatica 7BF din amilaza sericatotala8 si salivara 73F din amilaza serica totala8.
• prezenta in cantitati mult mai mici in #cat, sucul duodenal,
intestinul sutire, trompele uterine, muschii scheletici.
• macroamilaza ! forma moleculara rara ! izoenzima care, datoritadimensiunii sale mari, nu se elimina la nivel renal poatedetermina cresteri ale activitatii enzimatice
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 30/67
SE&NI)ICATIE C(INICA
- utile in diagnosticul si monitorizarea tratamentului in
pancreatita acuta, evaluarea in urgenta a cazurilor deadomen acut
-in conditii #ziologice$ cresteri moderate sunt raportate in
sarcina normala0 valori scazute se inregistreaza la sugari- ;alori de referinta$ H : =(
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 31/67
alori crescute&
• afectiuni pancreatice
– pancreatita acuta (crestere marcata, apare dupa 3-6 ore de la
debut);
– puseul acut survenit in cursul evolutiei unei pancreatite cronice0
– pancreatita indusa medicamentos0
– obstructia ductului pancreatic 7calcul sau carcinom, spasmul
oddian indus medicamentos, ostructia partiala plus stimularea
medicamentoasa80
– traumatism pancreatic 7leziune adominala, C'*E colangio
pancreatogra#e endoscopica retrograda80
– complicatii ale pancreatitei 7pseudochist, ascita, aces80
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 32/67
• afectiuni non-pancreatice &
! afectiuni ale tractului iliar 7ostructia caii iliare
principale, colecistita acuta80
- alterarea permeailitatii tractului gastro!intestinal$ oala
intestinala ischemica sau perforatie franca, ruptura
esofagiana, ulcer perforat sau penetrant, postoperator
dupa o interventie chirurgicala la nivel adominal superior,mai ales gastrectomie partiala0
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 33/67
• afectiuni non-pancreatice &
-ingestie acuta de alcool sau intoicatie alcoolica0
-afectiuni ale glandelor salivare 7parotidita epidemica,
in"amatie cu caracter supurativ, ostructie ductala
litiazica, iradiere80
-tumori metastatice cu secretie ectopica de amilaza 7valori
mai mari decat in pancreatita8
-ruptura de anevrism aortic,
-apendicita acuta0
-traumatisme cererale0
-arsuri si soc traumatic0
-aces tuo!ovarian0 ruptura de sarcina ectopica0
-macroamilazemie.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 34/67
alori scazute& • distructie marcata si etinsa a pancreasului
7pancreatita acuta fulminanta, pancreatita cronica
severa, #roza chistica severa etc.8,
• pancreatectomie,
• leziuni hepatice severe.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 35/67
A&I(A%A *INA*AConsideratii generale. Semni#catie
clinica
• amilazele se elimina oisnuit in urina
• amilaza urinara creste intotdeauna in paralel cu valoarea amilazemiei
• in pancreatita acuta amilaza urinara creste dupa 3!: ore de lacresterea amilazei serice si se mentine crescuta mai mult timp decataceasta
• cresterea amilazei serice asociata cu niveluri scazute ale amilazeiurinare se intalneste in insu#cienta renala si in macroamilazemie
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 36/67
Semni#catie clinica
- determinarile sunt utile in diagnosticul si monitorizarea
tratamentului in pancreatita acuta, evaluarea in urgentaa cazurilor de adomen acut
-in conditii #ziologice$ cresteri moderate sunt raportate in
sarcina normala0 valori scazute se inregistreaza la sugari
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 37/67
Semni#catie clinica
;alori crescute$
afectiuni pancreatice
• pancreatita acuta 7crestere marcata, apare dupa 4!3 ore de la
deut80
• puseul acut survenit in cursul evolutiei unei pancreatite cronice0
• pancreatita indusa medicamentos0
•obstructia ductului pancreatic 7calcul sau carcinom, spasmul
oddian indus medicamentos,
•ostructia partiala plus stimularea medicamentoasa80
•traumatism pancreatic 7leziune adominala, C'*E colangio
pancreatogra#e endoscopica retrograda80
•com licatii ale ancreatitei 7 seudochist, ascita, aces80
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 38/67
LDH ! catalizeaza (in conditii anaero1e) reducerea aciduluipiruvic cu formare de acid lactic in prezenta de N%H 5 H5
enzima intracelulara larg distriuita in organism,intalnita cu precadere in rinichi, miocard, musculaturascheletica, creier, #cat si plamani
+ . forme$ tipul ? 7?eart8 si tipul & 7&uscle8
+ se cunosc 5 izoenzime 7(D?:, (D?6, (D?4, (D?B,(D?5 8 rezultate prin cominarea celor 6 tipuri 7? si &8
(ACTAT DE?ID*+<ENA%A7(D?8Consideratii generale
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 39/67
• Valori de referinta:
- 1ar1ati 678-228 90&
- femei 678-26: 90&
• cresterile LDH sunt nespecifice, cu toate acestea testul esteutil pentru confirmarea diagnosticului de infarct miocardic sau
pulmonar! 'n infarctul miocardic persistenta nivelului &Hcrescut este mai indelungata decat a celorlalte enzime
Recomandari pentru determinarea LDH:
• diagnosticul retroactiv al infarctului miocardic,
• mar2er al hemolizei 7anemii hemolitice8,
• monitorizarea terapiei citostatice in diverse tumori.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 40/67
Semni#catie clinica
+ cresteri ale valorilor (D?$! in infarctul miocardic apar niveluri crescute de (D?
la 43!55 ore de la deut care persista 4!: zile0
! in infarctul pulmonar cresterile (D? se inregistreaza
in decurs de 6B ore de la deutul durerii toracice0! alte cauze de cresteri$ insu#cienta cardiaca congestiva,
afectiuni hepatice 7ciroza, alcoolism, hepatita acutavirala8, tumori solide, leucemii, limfoame,hipotiroidism, afectiuni musculare 7distro#i,traumatisme8, anemii megalolastice si hemolitice,convulsii, delirium tremens, soc, hipoie, hipotensiune,hipertermie, infarct renal, pancreatita acuta, fracturi,ostructie intestinala, mononucleoza infectioasa
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 41/67
+ catalizeaza transferul grupului glutamil de lapeptide ca glutationul 7<S?8 catre altiaminoacizi.
+ proteina heterodimerica, #ecare suunitate
constand dintr!un singur lant polipeptidic.
+ localizata la nivelul memranei citoplasmatice anumeroase celule, centrul activ al enzimei #ind
situat la eterior.
<A&A!<(TA&I(T*ANS)E*A%A <<T
! 7<(TA&I(T*ANS'E'TIDA%A8Consideratii generale
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 42/67
+ singura enzima care cliveaza cantitatisemni#cative de <S? si con/ugati ai <S? incadrul ciclului !glutamil
+ /oaca un rol important in metaolismulmediatorilor in"amatiei, cum ar # leucotrienele,sustantelor carcinogene si toice
+ <<T masurat in ser provine in special din #cat !cea mai mare parte este legata de lipoproteine,in special ?D( si (D(
Consideratii generale
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 43/67
Semni#catie clinica
+ indicator sensiil pentru depistarea alcoolismului !enzima a carei crestere depaseste celelalte enzimehepatice dozate in mod curent
+ in olile hepato!iliare <<T se coreleaza cu nivelurile
fosfatazei alcaline0 cresterile nu sunt totusi speci#cesi pot # asociate si cu afectiuni pancreatice,cardiace, renale, diaet zaharat.
+ utila pentru diagnosticul unei hepatopatii in prezenta
unei afectiuni osoase, a sarcinii sau in perioadacopilariei 7conditii in care valorile fosfatazei alcalinecresc, in timp ce <<T ramane la valori normale8
+ valori de referinta$ arati$ H 3: =(0 femei$ H 43 =(
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 44/67
;alori crescute$
•afectiuni hepatice $
! sindromul de colestaza <<T are valoarea diagnostica
cea mai mare0 in medie cresterile depasesc de 3 ori
normalul0 in colestaza etrahepatica <<T creste de J:
ori, <<T=ASTK4!3 in ostructia recenta si J3 in ostructia
de lunga durata0 in colestaza intrahepatica 7hepatita
acuta, sarcina, medicamente, oala ?odg2in, nutritie
parenterala, atrezia ductelor iliare etc.8 cresterile <<T
sunt mai mici0 in sarcina <<T nu creste la fel de mult ca
fosfataza alcalina0 copiii cu colestaza recurenta enigna
au niveluri normale de <<T desi icterul este prezent0
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 45/67
;alori crescute$
• afectiuni hepatice $
! hepatita acuta virala cresterea <<T este mai mica decat
a altor enzime hepatice 7<<T=ASTK.:!.68, dar revine
ultima la normal0 in formele colestatice <<T=ASTK:0! hepatita cronica activa, virala sau autoimuna cresterile
pot depasi de ori limita superioara a normalului
7<<T=ASTK:!480! hepatita alcoolica acuta <<T=AST J30
! ciroza hepatica cresterile sunt in medie de 6 ori in ciroza
posthepatitica si in /ur de : ori in ciroza alcoolica0
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 46/67
;alori crescute$
• afectiuni hepatice $- ciroza iliara primitiva <<T creste paralel cu fosfataza
alcalina, inaintea aparitiei icterului, cresterile putand
a/unge pana la de :4 ori limita superioara a normalului0- #catul gras de etiologie alcoolica <<T este aproimativ
dulu si persista crescut mult timp dupa intreruperea
consumului0 in #catul gras non!alcoolic predominacresterea usoara a aminotransferazelor, mai frecvent decat
<<T0
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 47/67
;alori crescute$
• afectiuni hepatice $
- tumorile hepatice primitive, metastazele hepatice
evolutia este paralela cu cea a fosfatazei alcaline si
cresterile pot depasi de :B ori valoarea normala0 <<T este
crescut la LF din pacientii cu metastaze, nivelurile
normale ecluzand practic prezenta acestora, iar
determinarile seriale pot monitoriza raspunsul la
chimioterapie0
- congestia hepatica cronica <<T poate creste de pana la
5 ori, iar in cea acuta 7e.$ tromoza de vena porta8,
cresterea este mica comparativ cu cea a transaminazelor si
d li li
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 48/67
+ provine din #cat, pancreas, cord si creier 7sustantaala80 rolul iologic al colinesterazei nu estecunoscut
+ indicator al functiei proteosintetice a #catului
+ *ecomandari pentru determinareapsudocoliesterazei serice$
-
indicator al unei posiile intoicatii cu insecticide0pentru a evalua functia hepatica0
- screening!ul preoperator al colinesterazei serice estefolosit pentru depistarea pacientilor cu forme atipiceale enzimei, care risca sa prezinte apnee prelungitadupa administrarea de anestezice de tip locante
'seudocolinesteraza=colinesteraza=colinesteraza IIa
Consideratii generale
S i# ti li i
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 49/67
Semni#catie clinica
+ Cresteri ale valorilor pseudocolinesterazei$
! perioada de vindecare a unei hepatite acute
! sindrom nefrotic 7datorita eagerarii functiilorproteosintetice hepatice8
+ Scaderi ale valorilor pseudocolinesterazei$! intoicatia cu insecticide organofosforice
! hepatita cronica
! ciroza! infarct miocardic
! infectii acute
! fenotipurilor atipice ale acestei enzime
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 50/67
+ C'M se gaseste in concentratii crescute inmiocard si muschii scheletici si, in concentratiimult mai mici, la nivelul creierului :
+ are o structura dimerica si apare su B forme$izoenzima mitocondriala si 4 izoenzimelecitosolice$ CM!&& 7musculara8, CM!&-
7miocardica8, CM!-- 7cererala8
+ la indivizii sanatosi, nivelul creatin2inazei totale
este dat, aproape in totalitate, de izoenzima &&
Creatin2inaza=Creatinfosfo2inaza7C'M8Consideratii generale
S i# ti li i
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 51/67
Semni#catie clinica
+ cresteri ale valorilor creatin2inazei$
+ infarct miocardic acut 7la B!3 ore de la deut8,miocardita severa, dupa interventie chirurgicaladeschisa pe cord si defriilare electrica, distro#emusculara Duchenne, polimiozita=dermatomiozita,traumatisme musculare0 radomioliza in cadrulintoicatiei cu cocaina0 sindromul mialgie!eozino#lie,
hipertermie maligna, convulsii, ischemie,hemoragie suarahnoidiana0 sindrom *ee
+ scaderi ale valorilor creatin2inazei$
+ re"ecta reducerea masei musculare asociata cutumori in stadiu metastatic, corticoterapie, oalaalcoolica a #catului, colagenoze
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 52/67
&asurarea activitatii enzimatice
+
In acest scop este necesara cunoasterea reactieichimice mediata de aceste enzime
+ Activitatea cataliticO a enzimelor se poate evalua Pn mod diferit$ #e dupO viteza de acumulare a
produilor reacQiei enzimatice date, #e dupO vitezade epuizare 7diminuare8 a sustratelor icofactorilor Pntr!un interval de timp dat
+ &etode utilizate$ metodele colorimetrice si
spectrofotometrice 7cel mai frecvent folosite inlaoratorul clinic8, "uorimetrice, manometrice,conductimetrice, vPscozimetrice, cromatogra#ce,electroforetice
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 53/67
&asurarea activitatii enzimatice&etodele spectrofotometrice se azeaza pe principiul
asorQiei luminii Pn domenii determinate ale spectrului7ultraviolet, infrarosu, viziil8, de cOtre sustratele sauproduii de reacQie, uneori de cOtre cofactorii enzimelor
+ metodele colorimetrice detecteaza o schimare de
culoare 7domeniul viziil8$ enzimele cliveaza unsustrat speci#c, produsul rezultat #ind colorat sau secupleaza cu un cromogen formand un comple colorat.
+ testele ;!se determina fotometric in lumina uv NAD?
=NAD'? produs sau consumat in timpul reactiilor,concentratia sa #ind direct, respectiv inversproportionala cu concentratia analitului 7e.determinarea A(T, AST8.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 54/67
&asurarea activitatii enzimatice
+ nitatea de masura pentru activitatea enzimatica$
+ :Kcantitatea de enzima care in conditii optimetransforma un mol de sustrat =minut
+ pentru ser activitatea enzimatica se eprima in =(
+ : Matal reprezinta o alta unitate de masura pentruactivitatea enzimatica$ activitatea cataliticaechivalenta cu transformarea unui mol desustrat=secunda
:=(K:3,3 nMat=( 7nMatK:!L mol=s8
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 55/67
&asurarea activitatii enzimatice
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 56/67
&asurarea activitatii enzimatice
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 57/67
Determinari enzimatice
prin tehnologii highthroughput !translatarea in clinica
Tehnologia &A' arra
(umine
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 58/67
&atri metalo!proteinaze !&&'
M t i t ll t i 2 i
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 59/67
• Matri# metalloproteinases, 2e enzmes intissue remodeling, are also associated Rithtumor groRth. Numerous studies shoRmodi#cations of &&'s activit in tumors0especiall changes of serum=plasma levels of&&'6 and &&'L in dierent carcinoma7mammar, pulmonar, gastric8. A goodcorrelation etReen &&' levels and tumorevolution transforms these enzmes into dualtargets ! of therapeutic and diagnosis interest.
• Signi#cant changes 7and Rell correlated8 arevisile in serum levels of some tissueinhiitors of metalloproteinases 7TI&'8, mostl
for TI&': and TI&'6.
Serum &&' 6 levels
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 60/67
Serum &&'!6 levelsin
'DAC patients
Serum &&'!L levelsin
'DAC patients
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 61/67
Conclusions
• Tissue remodeling mar2ers analsis7&&':, &&'6, &&', &&'L and TI&':8
shoRs a good correlation Rith positivediagnosis of 'DAC, et the do not seemto correlate Rith disease progression7ased on the eisting amount of data8.
Correlation analsis must e etended toother descriptors of disease progressionand perhaps therapeutic approaches.
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 62/67
'rotein 2inazele
• protein 4inaz; este oenzima 4inazica caremodifica alte proteine prin
adaugarea grup;rilor fosfat(fosforilare)! osforilareadetermina o sc3im1arefunc ional; a proteinei int;ț ț
(su1strat) prin sc3im1areaactivit; ii enzimei,ț
localizare celulara sauasocierea cu alte proteine!
• /ân; la 7<= din proteinele umane pot fi modificate prin
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 63/67
• /ân; la 7<= din proteinele umane pot fi modificate prinactivitatea 4inazelor, aceastea fiind cunoscute deoareceregleaza ma>oritatea cailor de semnalizare celulara -
transduc ia semnalului!ț
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 64/67
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 65/67
• ur stud? revealed t3at treatment of glio1lastomacell cultures from patient tumors @it3 /'7A in3i1itorinduced significant decrease in t3e e#pression levelof several 4e? signaling molecules involved in cell
survival (p7B), proliferation ("*A 602, 'CD, p7B%/Emitogen-activated proteinF-4inase, G*"D),differentiation ("*A 602, G*"D), migration ("*A 602,G*"D), and apoptosis ("*A 602, /<+IA, 'CD,
JNA, G*"D)!
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 66/67
8/19/2019 Curs 3 - Enzime 18 Martie 2015
http://slidepdf.com/reader/full/curs-3-enzime-18-martie-2015 67/67