TEHNICI DE TEHNICI DE RECOLTARE SI RECOLTARE SI TRANSPORT A TRANSPORT A PRODUSELOR PRODUSELOR PATOLOGICEPATOLOGICE

DIAGNOSTICUL DE LABORATORDIAGNOSTICUL DE LABORATOR ASPECTE GENERALEASPECTE GENERALE::

- Scopurile laboratorului de microbiologie Scopurile laboratorului de microbiologie sunt de a preciza: sunt de a preciza:

- bacteria care a cauzat infectia- bacteria care a cauzat infectia

- precizarea antibioterapiei- precizarea antibioterapiei

- Metodele prin care se realizeaza aceste Metodele prin care se realizeaza aceste scopuri:scopuri:

- metode directemetode directe::-diagnosticuldiagnosticul microbiologic (bacteriologic,micologic,virusologic) care presupune:

Tehnici de identificare microscopicaTehnici de identificare microscopica Tehnici de identificare antigenicaTehnici de identificare antigenica Tehnici de izolare si identificare pana la nivel Tehnici de izolare si identificare pana la nivel

de gen,specie,tulpina a microbului infectantde gen,specie,tulpina a microbului infectant metode indirecte (diagnosticul seroimunologic)metode indirecte (diagnosticul seroimunologic)::-tehnici de depistare a anticorpilor aparuti in

cursul infectiilor. Aceste metode impun: 1. recoltarearecoltarea produselor patologice de la pacient(umori sau tesuturi modificate biochimic,citologic

sau microbiologic)2.conservarea si transportul2.conservarea si transportul acestor produse la

un laborator competent

NORMELE DE PRELEVARENORMELE DE PRELEVARE

TREBUIE FACUTA DE CATRE MEDICTREBUIE FACUTA DE CATRE MEDIC INAINTE DE APLICAREA TRATAMENTULUI CU INAINTE DE APLICAREA TRATAMENTULUI CU

CHIMIOTERAPICECHIMIOTERAPICE DIN PRODUSELE PATOLOGICE SE PRELEVEAZA DIN PRODUSELE PATOLOGICE SE PRELEVEAZA

PORTIUNILE CELE MAI CARACTERISTICEPORTIUNILE CELE MAI CARACTERISTICE TREBUIE FACUTA IN CONDITIILE OPTIME DE TREBUIE FACUTA IN CONDITIILE OPTIME DE

EVOLUTIE A BOLIIEVOLUTIE A BOLII SE PRELEVEAZA O CANTITATE SUFICIENTA DE SE PRELEVEAZA O CANTITATE SUFICIENTA DE

PRELEVATPRELEVAT SE PRELAVEAZA SI TRANSPORTA IN CONDITII DE SE PRELAVEAZA SI TRANSPORTA IN CONDITII DE

ASEPSIE RIGUROASA ASEPSIE RIGUROASA

IDENTITATEA PROBELORIDENTITATEA PROBELOR

RECOLTOARELE(RECIPIENTELE) –vor RECOLTOARELE(RECIPIENTELE) –vor fi etichetate inaintea recoltarii probelor si fi etichetate inaintea recoltarii probelor si se va completa o fisa insotitoare in care se va completa o fisa insotitoare in care se noteaza: identitatea probei ,ziua si ora se noteaza: identitatea probei ,ziua si ora recoltarii,diagnosticul prezumtiv recoltarii,diagnosticul prezumtiv

Transportul produselor Transportul produselor patologicepatologice

Sa ajunga cat mai urgent in laboratorSa ajunga cat mai urgent in laborator Sa fie pastrata temperatura optima de rezistenta a Sa fie pastrata temperatura optima de rezistenta a

germenului pt a supravietuigermenului pt a supravietui In cazuri speciale se va putea transporta bolnavul in In cazuri speciale se va putea transporta bolnavul in

laborator sau se poate insamanta proba la patul laborator sau se poate insamanta proba la patul bolnavuluibolnavului

In circuitul bolnav-laborator se acorda probei cea mai In circuitul bolnav-laborator se acorda probei cea mai mare atentie pentru a se evita suprainfectarea mare atentie pentru a se evita suprainfectarea probei ,contaminarea mediului extern si a personalului probei ,contaminarea mediului extern si a personalului

Transportul se realizeaza numai de catre curieri Transportul se realizeaza numai de catre curieri instruiti in acast scop , folosindu-se containere specialeinstruiti in acast scop , folosindu-se containere speciale

Nici un produs patologic nu va fi expediat prin postaNici un produs patologic nu va fi expediat prin posta

PRINCIPALELE PROBE CE PRINCIPALELE PROBE CE POT FI EXAMINATE POT FI EXAMINATE MICROBIOLOGICMICROBIOLOGIC

SANGELE- HEMOCULTURISANGELE- HEMOCULTURI URINA – UROCULTURIURINA – UROCULTURI MATERII FECALE – COPROCULTURIMATERII FECALE – COPROCULTURI SECRETII SI EXUDATE –SECRETII SI EXUDATE –

OCULARE,NAZALE,OTICE,FARINGIENE,BRONSICE,OCULARE,NAZALE,OTICE,FARINGIENE,BRONSICE,URETRALE,VAGINALEURETRALE,VAGINALE

PUROIULPUROIUL LICHIDELE DE PUNCTIE-L.C.R,LICHID LICHIDELE DE PUNCTIE-L.C.R,LICHID

PLEURAL,ARTICULAR,ABDOMINAL PLEURAL,ARTICULAR,ABDOMINAL BILA BILA SCUAMELE CUTANATESCUAMELE CUTANATE MATERIALELE PROVENITE DE LA CADAVREMATERIALELE PROVENITE DE LA CADAVRE

Enumerarea etapelor diagnosticului Enumerarea etapelor diagnosticului bacteriologicbacteriologic Pentru acest scop trebuie sa retinem 3 categorii Pentru acest scop trebuie sa retinem 3 categorii

de produse patologice:de produse patologice: 1.Produse patologice necontaminate:produse 1.Produse patologice necontaminate:produse

recoltate prin punctia cavitatilor normal sterile recoltate prin punctia cavitatilor normal sterile ale organismului(sange,LCR,exudate ale organismului(sange,LCR,exudate seroase,exudate din sinusuri paranazale si seroase,exudate din sinusuri paranazale si urechea media ,urina,bila etc)urechea media ,urina,bila etc)

2.Produse patologice contaminate cu 2.Produse patologice contaminate cu microbiota indigena a traiectelor de eliminaremicrobiota indigena a traiectelor de eliminare naturalănaturală

(urina mictionata,sputa,bila recoltata prin aspiratie (urina mictionata,sputa,bila recoltata prin aspiratie duodenala etc.)duodenala etc.)

sau patologica (puroiul drenat prin fistule),sau patologica (puroiul drenat prin fistule), 3.Produsele patologice contaminate 3.Produsele patologice contaminate in situin situ : : materii fecale,exudat nazofaringian,vaginal,puroi din materii fecale,exudat nazofaringian,vaginal,puroi din

plagi,arsuri etc.)plagi,arsuri etc.)I.Recoltarea si transportul p.p.I.Recoltarea si transportul p.p.II.Examenul macroscopic II.Examenul macroscopic III.Examenul microscopic : al frotiurilor colorate si fixate III.Examenul microscopic : al frotiurilor colorate si fixate

si al preparatului proaspat intre lamă si lamelăsi al preparatului proaspat intre lamă si lamelăIV.Izolarea pe medii de culturaIV.Izolarea pe medii de culturaV.Identificarea bacteriilor izolate dupa:caracterele de V.Identificarea bacteriilor izolate dupa:caracterele de

morfotinctoriale,caracterele de cultura,caracterele morfotinctoriale,caracterele de cultura,caracterele biochimice,caracterele patologice,caracterele biochimice,caracterele patologice,caracterele serologice etc.serologice etc.

V.Testare sensibilitatii bacteriei infectante la antibioticeV.Testare sensibilitatii bacteriei infectante la antibiotice

SANGELESANGELE TEHNICA RECOLTARII TEHNICA RECOLTARII

SANGELUI DIFERA IN SANGELUI DIFERA IN RAPORT CU SCOPUL IN RAPORT CU SCOPUL IN CARE SE EXECUTA CARE SE EXECUTA

AVEM :EXAMEN DIRECT –sg. AVEM :EXAMEN DIRECT –sg. capilar recoltat din pulpa capilar recoltat din pulpa degetului ,examinarea in degetului ,examinarea in picatura groasa(frotiu pe o picatura groasa(frotiu pe o lama din 3 picaturi diferite) ,in lama din 3 picaturi diferite) ,in frotiu- o picatura din pulpa frotiu- o picatura din pulpa degetului se usuca si se degetului se usuca si se examineaza la micro.opticexamineaza la micro.optic

CULTIVAREA PE MEDII CULTIVAREA PE MEDII NUTRITIVE ADECVATE –NUTRITIVE ADECVATE –HEMOCULTURA-HEMOCULTURA-

HEMOCULTURAHEMOCULTURA Cultivarea pe medii nutritive Cultivarea pe medii nutritive

adecvateadecvate Se face in plin puseu febril cat Se face in plin puseu febril cat

mai aproape de debutul bolii mai aproape de debutul bolii prin punctionarea plicii cotului la prin punctionarea plicii cotului la adult adult

Insamantarea sangelui se face Insamantarea sangelui se face direct in mediu care se agita un direct in mediu care se agita un timp pentru a impiedica timp pentru a impiedica coagularea coagularea

Cand prelevarea a fost facuta Cand prelevarea a fost facuta sub tratament cu antibiotice se sub tratament cu antibiotice se recomanda folosirea inhibitorilor recomanda folosirea inhibitorilor specifici specifici

TRANSPORTUL SANGELUI TRANSPORTUL SANGELUI PRELEVATPRELEVAT

Lamele pentru examenul direct ,se Lamele pentru examenul direct ,se impacheteaza fiecare in hartie curata si se impacheteaza fiecare in hartie curata si se transporta la lab.transporta la lab.

Sangele prelevat pentru examenul serologic se Sangele prelevat pentru examenul serologic se transporta la rece la 0-4 C transporta la rece la 0-4 C

Timpul maxim de transport este de 24 ore Timpul maxim de transport este de 24 ore Pentru hemocultura –(izolarea ag. patogen sau Pentru hemocultura –(izolarea ag. patogen sau

evid. raspunsului imun celular)prelevarea se evid. raspunsului imun celular)prelevarea se face in unitatii intraspitalicesti la patul face in unitatii intraspitalicesti la patul bolnavului bolnavului

hemoculturahemocultura Reprezinta o tehnica de laborator ce Reprezinta o tehnica de laborator ce

vizeaza punerea in evidenta a prezentei vizeaza punerea in evidenta a prezentei sau absentei unor microorganisme sau absentei unor microorganisme patogene in sange, deci si depistarea patogene in sange, deci si depistarea starilor septicemice si precizarea starilor septicemice si precizarea germenului responsabil , precum si a germenului responsabil , precum si a antibioticelor active fata de acestaantibioticelor active fata de acesta

Metoda moderna utlizata in depistarea ag Metoda moderna utlizata in depistarea ag patogeni din sange este BACTECpatogeni din sange este BACTEC

Materii fecale coprocultura sau Materii fecale coprocultura sau coproparazitologiccoproparazitologic

MOD DE RECOLTARE-MOD DE RECOLTARE-coprorecoltor cu mediu de coprorecoltor cu mediu de transport Cary Blairtransport Cary Blair

Cantitate 5-10gCantitate 5-10g Transport 1 h (daca nu se Transport 1 h (daca nu se

recolteaza cu mediu)recolteaza cu mediu) Inaintea trat. cu antib. Inaintea trat. cu antib. Din scaunul proaspat emis se Din scaunul proaspat emis se

recolteaza portiuni cu mucus si recolteaza portiuni cu mucus si sangesange

Recoltarea cu sonda NelatonRecoltarea cu sonda Nelaton Tampon rectal – introduce in Tampon rectal – introduce in

sfincterul anal 1,5 cm sfincterul anal 1,5 cm

URINA-UROCULTURAURINA-UROCULTURA Toaleta locala cu apa si Toaleta locala cu apa si

sapun,se recolteaza in jet sapun,se recolteaza in jet mijlociu,nu se contamineaza mijlociu,nu se contamineaza recipientulrecipientul

Transport recipient steril cu gat Transport recipient steril cu gat larg , se transporta in 2 hlarg , se transporta in 2 h

Se recolteaza prima urina de Se recolteaza prima urina de dimineata sau la cel putin 4h de dimineata sau la cel putin 4h de la ultima mictiune,inaintea la ultima mictiune,inaintea inceperii tratament cu inceperii tratament cu antibioticeantibiotice

Controlul se va efectua la 3-5 Controlul se va efectua la 3-5 zile de la intreruperea zile de la intreruperea tratamentuluitratamentului

EXUDATUL NAZALEXUDATUL NAZAL

Tamponul steril se Tamponul steril se introduce 2 cm in fosele introduce 2 cm in fosele nazale (un tampon nazale (un tampon pentru fiecare nara)pentru fiecare nara)

Recomandat in principal Recomandat in principal pentru depistarea pentru depistarea purtatorilor de purtatorilor de Stafilococcus aureusStafilococcus aureus

Streptococcus pyogenesStreptococcus pyogenes Transportul –mai putin Transportul –mai putin

de 2 hde 2 h

EXUDAT FARINGIANEXUDAT FARINGIAN Mod de recoltare- se deprima baza limbii Mod de recoltare- se deprima baza limbii

cu un apasator steril,dupa care se sterg cu un apasator steril,dupa care se sterg cu tamponul amigdalele si peretele cu tamponul amigdalele si peretele posterior al faringelui-zone posterior al faringelui-zone inflamate,ulcerate,depozite purulenteinflamate,ulcerate,depozite purulente

Recoltarea se face inainte de ingestia Recoltarea se face inainte de ingestia alimentelor sau toaleta cavitatii bucalealimentelor sau toaleta cavitatii bucale

Transportul in 2hTransportul in 2h

Lichidele de punctie(LCR,lichid Lichidele de punctie(LCR,lichid pleural,articular,abdominal etc.)pleural,articular,abdominal etc.)

Se dezinfecteaza zona de Se dezinfecteaza zona de punctie cu punctie cu antiseptice ,extragandu-se antiseptice ,extragandu-se 5-20 ml lichid5-20 ml lichid

Transport mai putin de 15 Transport mai putin de 15 minmin

Observatie –se recolteaza Observatie –se recolteaza concomitent si concomitent si hemoculturahemocultura

SPUTASPUTA Mod de recoltare: dupa toaleta cavitatii Mod de recoltare: dupa toaleta cavitatii

bucale,bucale, Pacientul tuseste si expectoreaza intr-un Pacientul tuseste si expectoreaza intr-un

recipient steril(cu gatul larg si cu capac recipient steril(cu gatul larg si cu capac care se inchide ermetic)care se inchide ermetic)

Observatii :se recolteaza dimineata cObservatii :se recolteaza dimineata câând nd fiziologic este “toaleta pulmonara”fiziologic este “toaleta pulmonara”

Transport –mai putin de 2hTransport –mai putin de 2h

ALTE TIPURI DE ALTE TIPURI DE PRELEVATE PRELEVATE

Puroi din abces deschis si inchisPuroi din abces deschis si inchis Cateter Cateter Cavitatea bucalaCavitatea bucala Celulita Celulita Lichide –ascita,bila,lichid Lichide –ascita,bila,lichid

sinovial,pericardic,peritoneal,pleuralsinovial,pericardic,peritoneal,pleural Exudat otic,oftalmicExudat otic,oftalmic Secretie trahealaSecretie traheala Secretiile vaginale si uretraleSecretiile vaginale si uretrale