Date post: | 13-Feb-2018 |
Category: |
Documents |
Upload: | dragos-trisca |
View: | 220 times |
Download: | 0 times |
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 1/18
Anticorpii in examinarea
celulelor
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 2/18
Anticorpi - Defnitie
• ANTICORPI: proteine specifce elaborate de organismca răspuns la prezenta unui antigen.
• Antigen: orice proteină străină organismului producator de anticorpi; prin extensie, orice
proteina (sau glican, proteoglican) care nu apartinein mod normal unui compartiment al organismului
• Epitop: o portiune dintr-un antigen care este legatade un anticorp;
• Uneori defnita si ca “Cea mai mica portiune din
antigen care poate f legata de un anticorp”• O imunoglobulină, în orma literei “Y, produsă de
limocitele !, olosită de sistemul imun pentruidentifcarea "i neutralizarea particulelor străine.
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 3/18
#tructura unui anticorp
Situsuri de combinare cu antigenul
Lantusor(L)
Lantusor(L)
LantGreu(H) LantGreu(H)
Portiuneariabila
Portiune!"a
#ragment $#C% & #ragment legare a
com'lementului
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 4/18
$ipuri de anticorpi
• Anticorpi policlonali% sunt anticorpii produsiin mod normal in organisme. #unt produside mai multe tipuri de limocite ! sirecunsoc epitopi dieriti ai aceluiasi antigen.
• Anticorpi monoclonali% produsi prin metodede recombinare, de “&ibridoame 'produside uziune intre un (imocit ! si o celulatumorala 'mielom). Au capacitate dereplicare infnita '*) si sintetizeazaAnticorpi '(!). +n A* recunoaste unsingur epitop al unui antigen.
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 5/18
aracteristici
• A!nitatea anticor'ului masoara taria interactiunii dintre unepitop si un situs de legare a anticorpului
• ste defnita de principiile generale ale termodinamicii priindinteractiile intermoleculare%
• A / constanta de afnitate• Ab* / concentratia molara a situsurilor de legare neocupate de pe
anticorp• Ag* / concentratia molara a asitusurilor de legare 'epitopi) de pe
antigen• Ab,Ag* / concentratia molara a complexelor anticorp-antigen• u alte cuinte, 1 A descrie cantitatea de complexe A!-Ag la punctul
de ec&ilibru. ste cuprinsa intre sub 234 mol-2 si peste 2325 mol-2,.•
Afnitatea A* se poate masura cu acuratete, deoarece suntomogeni.• Afnitatea A6 este inexact determinata, deoarece reprezinta
amestecuri de A pentru dieriti epitopi si cu caracterisitici delegare dierite
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 6/18
• Aiditatea Anticor'ilor• Aiditatea da o masura a tariei generale a
complexullui anticorp-antigen. Depinde de%• Afnitate• 7alenta anticorpului si antigenului• Aran8amentele structurale ale partilor in contact• $oti A sunt multialenti9 :g; sunt bialente iar
:g* sunt decaalente9 cresterea alenteiinseamna cresterea capacitatii de antigen carepoate f legat.
• A; pot de asemenea sa fe multialente,deoarece se pot lega la mai mult decat un A
• :ntercatiile multimerice a8uta la stabilizare.
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 7/18
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 8/18
*arcarea 'coloratia) directa
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 9/18
$estele de tip “(:#A
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 10/18
oloratia indirecta'anticorp secundar marcat)
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 11/18
$e&nica
• #ectiunile pe lama se “bloc&eaza pentrulegarea nespecifca cu Albumina sau cu(actalbumina
•
#e incubeaza cu A primar 'nemarcat)9• #e spala A primar9 blocare• :ncubare cu A secundar• :ncubare cu amestecul de izualizare -
dupa caz, DA! 'peroxidaza), p-nitroenilosat 'osataza alcalina)
• xaminare la *O
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 12/18
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 13/18
7izualizarea :< a “6ar=inei lapacienti cu $!
:< ? t i 7;@ '
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 14/18
:< > ?eceptori 7;@ 'ancermamar)
oloratie @osataza alcalina
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 15/18
Amiloid beta, creier uman'6eroxidaza)
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 16/18
O<d > piele umana '6A)
@ ti &i t d d
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 17/18
@-actina, musc&i neted desoarece,
col. DA!
7/23/2019 Anticorpii in Microscopie
http://slidepdf.com/reader/full/anticorpii-in-microscopie 18/18
-mc, < uman, col.6eroxidaza 'brun)