of 10
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
1/10
Numrtoarea direct
microscopic cu epifuorescen
Facultatea de Inginerie Alimentara
Controlul si expertiza produseloralimentare
Universitatea tefan Cel Mare dinSuceava
Anul II
ndrum!tor "#ect$ Univ$ %r$ #o&iucAndrei
Student "'rimiuc Ioana(Andreea)rigora* Mariana(C!t!linaC+,A- )rupa" ./
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
2/10
Microscopul este
un instrument optic care transmite oimagine mrit a unui obiect observat
printr-un sistem de lentile.
Scurta introducere:
Milioane de particule care joaca
un rol important n procesele
biologice ar trece neobservate fr
ajutorul microscopului. Acesta
mre te obiectele de mici dimensiuni
pentru a dezvlui detalii invizibile cuochiul liber.
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
3/10
Microscoapele pentruepifuorescen n cazul nostru, aparaturafolosit pentru determinarea acestuiprocedeu 0um!r!toarea direct!microscopic! prin epi1uorescen2!- se va determina cu ajutorulmicroscoapelor cu lumin articial.Majoritatea microscoapelor care sunt
folosite pentru biologia celular suntaranjate astfel nct lumina s treacprin lentilele obiectivul pentru ailumina proba, !i pentru ca mai apoilumina emisa din prob s treac
inapoi prin acela!i obiectiv inspredetector. "e obicei cercetarea respectiveipropriet#i are loc n prezen#a uneimolecule numite fuorocrom. $ste un
agent de colorare care adaugastralucire %uorescenta, specimenelor
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
4/10
,ro&a de analizat estesupus! unei lumini cu o
anumit! lungime de und!$3adia2ia luminoas! estea&sor&it! de c!tre1uorocrom- care mai apoi vaemite o alt! radia2ieluminoas! cu o alt! lungime
de und! 4de aici *i o alt!culoare a luminii emise-culoare diferit! fa2! de ceaprimit!5$
Cum lumina de excita2iea6unge aproape 7n totalitatela suprafa2a specimenului-numai lumina re1ectat! *ilumina emis! a6ung la
o&iectiv- iar acest faptconfer! metodei o&2inereaunui semnal 7m&un!t!2it 7ncompara2ie cuinterferen2ele care apar
Pseudomonas putidaUnde " 4 A 5 corespunde la canalul1uorescent ro*u microcoloniidonatoare $ 4 / 5 arat! canalul1uorescent verde4 C 5 este o imagine compus! dinam&ele canale cu valori crescutecontraste $
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
5/10
+xamenul 7n 1uorescen8! 9e:nica de iluminare a preparatului poart! numele de
epi1uorescen8! ;i se rezum! la o&servarea culorii1uorescente dup! excitarea preparatului cu o lumin!
ultraviolet! incident!$Utilizarea te:nicii de examinare in 1uorescen8! poate ? Col$( verde luminos- iar pentru
colorarea amidonului 3o*u de Congo- acidul periodic-
solu2ia #ugol$
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
6/10
Tehnica DEFT
&ceast te'nic a fost creat ini#ial pentru a
enumera bacteriile din lapte la (nstitutul )a#ional pentru*utare, n "air+ing, eading. e'nica "irect de $pi%uorescen# cu iltru/"$0este o metod rapid pentru enumerarea bacteriilor. "$- este utilizat la scar larg n industrie
pentru lapte !i produsele din lapte, !i s-a aplicat deasemenea !i pentru buturi, specimene clince !i pentruelemente de mediu. Implic capturarea celulelor bacteriene pe
suprafata ltrelor de membran policarbonate,colorndu-se cu un uorocrom ca i acridina
portocalie(orange) i vizualizarea utilizandmicroscopia de epiuorescen !numerareabacteriilor este facilitat cu a"utorul acestuisistem
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
7/10
Avanta6ele metodei %+F9 "
$ste o metod1- apid - ezultatele trebuie s apar n mai pu#in de 23 deminute4- 5ensibil - estul trebuie s e mai bun decat celelalte/ testulesaurin04
- 6recis - ezultatele testului trebuie s coreleze semnicantcu cele ob#inute prin celelalte metode.- *onvenient - Metoda trebuie s e potrivit pentrulaboratoare !i laboran#i.- $conomic - )u prezint pre#uri ridicate.%ezavanta6ele metodei
%+F9 "6rezint o marj de eroare ncompara#ie cu alte dispozitive dedetectare.
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
8/10
Microorganisme viabile sineviabile
- Microorganismeviabile#articulele viabile includbacteriile, fungii si sporiilor$ particul viabil
reprezint o particul ceconine unul sau mai multemicroorganisme %n via&etoda de monitorizare a
acestor particule este de a lecaptura, coloniza i numra
-Microorganismeleneviabile'e refer lamicroorganismele ce
nu pot cultivate
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
9/10
Concluie
Metoda const n observarea culorii%uorescente dup e7citarea preparatuluicu o lumin ultraviolet incident .5erealizeaz cu ajutorul microscopului
specic - cu lumin articial ce se mainumeste si stereomicroscop, microscopcompus.6rin intermediul %uorocromilorce sunt compu!i c'imice ce re-emitlumina prin e7citarea luminii. "up cum
am e7plicat !i mai sus, pot de diferitetipuri, din diverse familii ins prezentndacelasi rol - de a re-emite lumin.
7/26/2019 Prezentare microbiologie - microscopie
10/10
!magini "