Capttor.ur. XV

GENELE HOMEOTICE I/. PIANTE

r. INTRODUCERE

, Ternrenul de ,,honeosis" a fost propus de citre Bateson, in anul 1894, spre alesentrta asurttarea de qitre un rnembru al Lrnei serii merice a fomrei ;i a cancterelorrltor rnernbrii ai seriei. Inci din anul 1778, rnarele poet si savant gemran J.V.r,Soethe a descoperit cl plantele consrau din nunteroase organe onroloage si cirinsfornrarea progresivi, pe care a lurnir-o norfogenezi, survenitt in tintpul acesteiiezvoltdri incepe cu forrnarea frunielor $i se ternrini cu fornrarea pdrqiJor carerlcituiesc florile. El este autorul conceptiei despre netnnorfoza frunzei in /lottre.. Dupi punerea la punct a nretodelor de biologie rnolecrrlari, srabilite la

Drosophik me/tnogaster,la care au fosr desioperire rnunrire gerrc care alr capaclrarea{e;fcontrola dezvoltarea organelor normale la locuri potrivite, srudiile au conturuarsi la planre, la care au Fost iderrtificate nllnleroase rrrutante, caracterizare printrirsfornurea unuiorgan irr altul. Genele inrplicrre irr aceste procese, au forinunri,.gene homeotice si ele sunt cunoscute ca avind rol in corrtroLrlorgarrelor la toateeucariorele plrrricelr r ll re.

Reglarea dezvoltlrii la nivel molecular la plante este bine inqelcasi in ceea ceprivegte diferenqierea florilor, Aceste procese incep aturci c5.nd meristemele vege-ntive rispund la semnale de inducgie florali, geuerate in corpul plantei, ca rezultatal acqiunii serunalelor din mediul exterrl, curll ar fi lungirnea zilei, 5i se incheie

cu tnnsfomarex acestor ureristeme vegetative in iltflorescenle sau tneristenre florale.

l. Caracteristici srntcruralc ale gcnelor irttplicate in procesul tlc dczvoltarc-MADS -

DOXeS

Genele horneotice ( homeobox) su;,.' gen e ce codifici Pentru domerrii Proteinice,cu rol in procesul de dezvoltare. Fiecare geni horneotici are url dom€niu

i22 (; f lr\ ( )N1 I ( lA

caractcristic de acfiune, definit cit o rci{iUn!' it corpului ce sufefi i o t|r lrsh)fl]t: lrcin cazul nrur:rt iei eenei respcctive.

N'IADS l-rox srrrrt secver)!e consen ilre, ruorive ce ap:rrrin trnor fenril i i dc f:rcrotit ra r tsc r ipc io la l i , l l ces tc donrcn i i conserva tc f l in t l t cc r r r rosc t r re dLrpn 1r l i111 i i px11, 'n rcmbr i i a i fa r r r i l i e i : MCNI l , AGA\JOUS, DEF, SRF.

Sttrdii le cie genericri lrolccullr 'ar rerl izrce ltt r lrtbilol,sis si grrti leulrri, precunrs i le a l te spcc i i , au denrons t ra r cx is re r r i r r r ra i n r r rJ to r gene in rp l i c r rc d i rec t in,.lczvolt:rrea floralr-r. N{rrlte din lccsfe qcne conrin donrt'nii NIADS-box, carr, 'sLrnrinrplicrrte in lcglrca cie ADN si donreli i K-box, care surrr inrplicrre in dintcr.izarcrrp rore in ic i . (19)

Gerc le NIADS-box joac i i u r l ro l in rpor r r r r t in t i rnpu l dczr ,o l t i r i i s i e ro lu r ic if lorl le si cocJihci penrru factori t lan5lripliellxl i cu rol in trlnscltrcri l sentrrulelorsi cortrolul clezvolrrir i i pllnrelor. Donrcnii lc NIADS,box sunr clonrenir conscwetc,c le 55 l r t r inorc iz i lung in rc s i cu un c ip l r N te rn ina l l l p ro te ine i ce prcz lx r louro log ic cu c {or r reu i i l c K-box . Dor r ren i i le l r {ADS sunr s in r i l l re s i cu r l te c lonren i iclc l l eucirriore ce irrclLrcl: irtverrlz:r l, l ieratirr, l ikc, C-tcnlinal.

Exisrrl nrai nrrrltc [rnii l i i cle proteine N,fADS ce au fosr subc]ivizrrte irr rloLrrisubftrni] i i : 1. lacrori cu rol in procesul cle clczvolrare;

2. ftcrori cu ro] in rrrhirecturl nrolccular.i, nrorfologia floral:r.lVlai rrrulr cle l2 gene lr4ADS-box au losr iclerrif icatc l:t Arabilopsit, Ztt,

As2,ragus, Lycopersicorr, clar si h ule'le ginrrosperne. 1,-unctit acestor gcne nu esrecuDoscull i cu exacrit i l te, dar s-a denronsr(lc ca ci se explinti exclrrsiv iu 0ori,sLLpleri ind asrfel lolrrl lol in clczvoltrrrea f: lorala.

l '-actori i \.IADS, sprc cleosebirc de gcrelc HOX cle lrr anirrrale, clre srrnr gnrpart

in c lL rs tc l i , sun t d ;s r l ibu i r i impr is t ia t in gcnon l r l p l rn rc lo r . Genc le N, IADS borsunt ;nlplicate in cl iversif lclrc.r f lorl l i , cleotrcce elc regleazli nrajoritateu cnilor.clcnrorfogerezl f lorl lar.

Analiz-ele {i logcnetice ale i{cnelor l i{ADS box eu relevat f iptul ca acestc gcrcsunr orgrnizrte in urul,Lrri disrincrc, nrcnrbrii f iecilei grLrpe rrv:incl un rol sinri larin clezvolnrcl f loralri. Gcnele jVIADS conrrolcirz:i fornrrrrea rrerisrenrclor f loralc,lo l t t ta r . r t o rg . t r t r l , , r f l , ' r r r l< s i i , l cn t i r l t c r .1 . . , , rg . r r r .

Analize nrolecrrlare aLl relcvllr ftptul ca accste gerle s-iLl conscrr/rt in ev<llLLtie,deolrece existri genc altcestrxlc in ficcare clin acest grrrp clrre arr lLrat rrasccLe in.Linre.rapar i r ie i i r la l te lo r cLr f lo r i . (19)

Stud i i le au denronsr r l r cx is re rca a doun proccse chc ie in rp l i c l re in s t l i r i l i reustrrrcturi i orgarrelor aeriene lir plante. Plirrrul proces consri itt snl., i1it,,t sn tr.turtimeristantrlui tTicol, inclrrzind poziriu si dezvolrarer prinrordii lor, iar al doilea processe rcferi h, t?e.iJ)Lutet iientittitii rlezt,oltririi ,rettor f,tiuorrlii.

( ; I iNoMICA

2. l)roccsclc r lc inr luct ic ( ini t icrc) f lorr l i

Artiospcrruclc rcprczinti tttt grup dc plarrrc inLalrritc ciin abtirtdetrti peste tot

in [ume, avincl strtrcruri sofisricirte de reproducere, clrc au fircrrr olt icctr.t l a

ouu)eroase studiicLr privire Il iclenri6clrea eenetoI intplicate r'rt dez,voltl lc,t f lorali.

Flori le iau nastere cliu ureristcnrc apic:rle alc l lsrari lor. Meristentelc sunr nrici

populati i de cclulc steru care se di' icl cu riurruri irrrense penrru a produce celule

iclcnrice clin clrc prin difcrentiere vor cla lasreLe oLgarelc,r f lorale. Orgarrele florale

iau nastere sccvential, incep:ind cle la formarea sepllelor urtlari clc fornrarea

petalelor 5i st,rnrinelor si in f inal fbrtuarea catpelclor.

Descoper i re l n ru ta r te lo r , , l i ps i te de lhnc1 ie" , in care f lo r i le sunt in locu i te cu

strr-rcrLrri irternrcdiare intrc l israri vcgcrarivi qi f lorali, releva existenta uror reglatori

care controleazi procesele tle iniricre flotah (Fl-lP).

Urrul dintrc c'enimentele irrtporrartte cit rol itt clezvoltarea flori lor la plante

il reprezir t i f i ;ro7,r riodisnru l. N{ultc specii de planre ,ru nevoie perttru r inflori de

o fotoperioacii corccra.

Ntrlrreroase srLrcli i , iurplicincl gerele pentru fitocroni h Ar,tbilopsfu, au

clcrrronstrat ci f iccare floare este clepcrtderti in nrlrc ttri isuri i de fotoperiod isrl. (!)

De exenrplu, loroleceptorii penrrLr culolrea albasrri aplr cr jucri ld ur rol ituporratrt

i r r r . rspr r r r ' r r l lo roper iod ic l l c ico lv . r spcc i i .

. i ,r ceea ce prive;te semnalele care sulr rrxnsnlise la tneristetue, s-au adlts

hrgunrerrte priviroarc Ia exisrenq:r urror substanqe c{if irzibile, cLrm ar fi ,,f loLigenul",precuu ;i a cel purin unei gene inrplicati in trl lsruirerea senrlalelor.

De exenrplu, l lr Arabidopsit, cxisti gene implicare irt ntedierea setrrtralelor

cal auloDomc

rispLrlzitoare de clezvolrarea

floll l i , in Rrnctie cle semnalele

foroperiodice. Una din acestegelc estc gena CONSTANS(CO), care estq trlnscriptioral

4ctiJii, tllspurlsul sdu estc iudus

de Fotoperiodisnr, iar nruranteleCO se caracterizclzi prinrr-o

perioadi de 'infloLiLe

foarre tirzie.

Gena CO codiflci pentru o

proreini zinc-finger care, alituride factorul trauscripqional

GATA- I, semnifica faptul ciproclusii tralscriptionali ai genei

CO produc factori specifici

523

fotopeioada

IcoNslANS

V

l i ig. I - ' l lc i cr i pclrnr incluct ie f loral i : rurrtazr

crxl i l ic i pentrrr un rcqulator trarrscript ional st inrul l t

r lc f i rrolterioci isnr: ci l r isl)uns h accs(e sctrrtrele, i t t

rrcr istcrnelc i lor l lc sunr acrivatc gcrtcle LJIAl iY si

API],'|AI,A I.

l^-DUCllts I LOR^LA

^-'- \I,F,AFY -'-} APE'|ALA

524 GENOMICA

pentru formarex florilor 5i ospuld de semnalele luminoase. Totodard, s-a evidentiatfaptul ci nivelrrl expresiei CO este critic penrrtr inducqia florali.(figura I ).(10,I I )

LFY si A-PI sunt considerate ca jucind prirrul rol in iniqierea prograurului deinflorire.

Pe de alti parte, s-a evidentiat faptul cl 5i hormonii plartelor, cum ar figiberelinele au rol in inflorirea indusi de fotoperiodism. (fig.1) La alte specii deplante, la care florile nu sunt induse de fotoperiodism, existi gi cli autonome carecontribuie, de asemenea, la inducgia florali.(fig. t)

Gena Fll,4 codificr un receptor albastm pentru lunrinl. Mutagia //ry determinatide superexpresia unui lactor MlB de transcriere, strins irrrudit cu CC,41, determintrirrflorirea tirzie, insensibila la fotoperiodism, si perrurbeazi funcgionarer ritmuluicircadian. Un felotip similar este cauzrr de s.rperexpresia factorului CC,41, sugerindrolul ritmului circadian in controlul infloririi, ca rispulrs la fotoperiodism, asacunr a fost auterior sugerat de citre Gnoripul mutantei 3, care determini inflorirearinrpurie ;i irnplicit perrurbarea fuuclionirii ritmului circadian.

Ln Ambidopsb au Fost idenrificate 9i clolate doui gene cu rol in acrivarea ciiloraurononle pentru inductia florall 9i clre codifici pentru proteine reglatoare, Deexemplu, gena LUMIDEPENDENS (l-D) codificit pentru un produs care estesirrrilar cu uu acrivaror rranscriptional si include o regiune bogetr in glutaminisi un horneodonreniu-like motiv.(12) Genele ZD 5i FC4 codificl penrru proreirrereglatoare, respecriv un factor de transcriere pi o proteind de legare a ARN. Proteina1-D forrnati din 953 aminoacizi, include doui serrrrrale bipartite cu localizarerrucleari, un donteniu bogat h Gln, la, capitul carboxi- termiual, siruilar celuiintilnit la activatorii transcrierii de la mamifere, $i trn homeodonreniu prezurrr cir.in regiunea amino- cerrninali. Gena FCI codificl o proteini care conqine douidonrenii de legrLe a ARN si un doureniu 17\7 de interactiune proteinictr, carefuncgioneazt ca un reglaror posrtranscriplional. Transcriprul -FC4 este supussplicing-ului alternariv, generind parru produsi in c:rnritigi diferire (c, p, y, si6). Transcriprele FCZ sunt prezenre in canritate redusi, coucentratiile si nporturiledintre ele fiind constante in toate organele si sradiile de dezvoltare analizate.Transcrierea ge.ret FCA de la pronrotorul 35S duce la o acumulare crescutr detranscript p 9i la o acumulare mai scazuri de transcripte y si 6. Superexpresirtranscriptului p nu a reinstaurat inflorirea timpurie in liniile fcn, fenotipll355IFCAdatorindu-se unei cre5teri rnici a cantitiqii de transcript y, singurul produs carecodifice proteina -FC7 de lungime normali.

Cercetiri privind genele homeotice la plalte s-aLr realizat prin studirrl nrutanrelorIrorrreotice la geturlle Arabidopsis 5i Antirrhinunt, precum pi la alte angiosperrre.

GIl,NOMICA

3. PRINCIPALELE MUTANTE HOMEOTICEI,A ANA,B I D O PS rc TIIALUNA

La, Arabidopsis thnliana, nrcrisrentcle apicale genereazi prinrordii pe flancuriin spirali, iar procesele de dezvolrare a ace.stor primordii sunt specifice pentru frunzecu nreristeme ariilare, frunze cauline cu meristeme sirnilare sau flori.

Au fost identifrcate mai multe clase de mutalte ale genelor implicate in procesuldezvoltirii orgarrelor florale, la, Arabidopsis thaliaru4 qi u'tune

l) mutante ale genelor ce afecteazi dezvoltarea prirlordiului floral;2) nrurrnte ale genelor ce afecreaztr sin)erria;3) urutante ale genelor ce afecteazi identitatea de organ.

, 4. MUTATII ALE GENELOR CE AFECTEAZ4, DEZVOLTAREAPRIMORDIULUI FLOPAL

Dinrre rrruranrele identificate h Arubidopsis, avind afectari dezvoltareaprimordiului floral, cele mai importante sunt:

a) sterilis- prezenga de brectee firi flori in a.xila bracteelor;b) steriloides- prezenga de bractee doal in inflorescente;c) squamosa- initierea primordiu[ui esre nomrali dar, in loc de flori, prezinrt

a.rie nedeterminate crre s€alnlni cu inflorescenta, crescure in axilele bracteelor;d) floricaula- exprimxrea gerei Jlo are loc secvenlial, in primordiile foarte

timpurii ale bracteelor, sepalelor, petalelor si carpelelor, nu insi 5i in stamine.Produsul geneif/a pare a fi implicat in direcqionarea modelelor specifice de expresiegelici, in ureristerlele florale rinrpurii, fi ind necesar pentru tranziqia de lameristemele de inflorescenti lx meristemele florale. Srudii recente au denronsrrarfaptul cr fa florile n\Lt t\re de Amb loptit, in locul merisrenelor florale, se dezvoltlmeristeme de iuflorescenqi nedeterminate. in locul florilor, in axila bracteelor sedezvoltd axe nedetenninate, care la rendul lor poarttr bractee.

Au fost identificate 5i gene implicate in identitatea meristemelor apicale.Principalii factori cheie cu speciftcitare perrru nreristernele florale includ rlutantele:LEAFI, APETAI-A r si CAULIFLO!7ER.

Ca rispuns la induclia florale, meristemele vor da nagtere la flori. l.a lrubidopsis,au fost ideutificate dout gene responsabile de identiracea gi specificitateameristemelor florale, 9i anume LEAFY si APETAIA l. Muratii in fiecare din acestegene LFY si API cauzeazi substituirea lneristerlelor flomle cu qpariqia deinflorescen;e nedeterminate. ( I J ) LFY si AP 1 nu sturt intotdeauna necesare peutruformarea meristemelor florale; expresia ectopia a fieareia dintre gene este suficienti

525

526 CF]NoMICA

pentru a induce identitatea merisremelor florale. Expresia ecropici a genci I-1.-Yare ca efecr convenirea meristernelor de in0orescelti la qreristelre florale.(13)1-FIeste un produs nuclear capxbil de a lega ADN ix uitro, deSi este diferit deceilalti frcrori de transcriere cunoscuti (\(leigel, 1995). AP2 codihcl o proteiricare prezinti un dorleniu nou de legare la ADN, avnnd ornologie cu proteinelede legare de elementuJ de rispurs la etilen (oftrku si colaborarorii, l!94; \Xleigel, 1995).

Mutanteie ff, forrreazi listari axilari in locul florilor si nu fonrreaztr perale saustarrrirre, la dublrr r:nuttntele lfu/apl rpar extrem de rar stmcturi tip floare (Shalnousi Meeks-\7agner, 1993). Mutatiile genei C,41. intersifici efecnrJ mutaqiilor a21.Efectul mutariilor ap2, la nivelul identitnrii meristemelor florale, a fost observatdeoarece mrrtagiile a12 inrensifici fenotipul nrutantelor npI si //,. Redundantacelor parru gene de identitate a rneristemelor florale iudici faptul ci ele prezinttfurrclii care se suprapun partiai. De exeurplu, dublu nutantele apl /co/n u exprirniLFY si .:r,ci AP I .

Pe de alri parre, a*ivarca genei TERIvIINAI- FLO\X€R (TI-F) are ca efectinducerea expresiei genelor l.FY si API din nreristeme de inflorescenri, h neristenreflorale, cu flori terminale( l4 ).

Aceste rezultate sugereazi fapnrl ci LFY este activari prin gibereline, avindca efect inductia florah.(fig.1) Anrliza unor dublu mutante API si LFY a ariratci multe gene ale ciii arrtonome sunt lecesare perrro pronrovarea expresiei geneiAPI care mai deparre are efect induciv, mediind activrrea I-FY.(15)

Snrdii receute au aritat c.i LFY codifici peltru un produs sinrilar cu alte proreinecu functii biochimice cunoscute, dar s-a denronstrat faprul ci totusi, LFY codificipentru ull activator rranscripqiotral care se leagl de secvengele pronrororuluiAP1.(15) AP I codificl perrru un produs care preziuti sinrilitudine cu cei diuhniilia MADS-box, conrinend factori transcriptionali legati la ADN.

Cel mai important rolalgenelorAP1 si l,FYeste acela de a stabili adr identitateameristemelor florale, cXt si reglarea transcripqionali a genelor cu identirate de organ.

irr anul 1992, LEYSER Si FURNER au artrrat cd plantele ,4 rnbidopsis prezintisi alte tipuri de gene implicate ir determinarea specificiaqii nreristenrelor florale,cum ar fi C["{VATA 1, FASCINATA 1 si FASCINATA 2, ale ci.ror mutatii deter-mini dezvoltarea unor iuflorescene fascinante, dar si o afterare a dezvolttii frurrzelor.(4)

Florile mutautelor CIAVATA sunt spiraiate, aceste flori spiralate nefiindprezente si la tipul salbatic. Studii recente au demonstrat ci dtrblu ruutanti,CTAVATA I cu AGAMOUS si CIAVATA I cu APETAI-A 1, APETATA 2, siPISTIIATA, indici rolul si coutrolul CIAVATA in strucrura meristemului floral,iar dublu muranti CLAVATA cu I-EAFY si APETALA 1, indici fapml ciCI.AVATA joaci un rol imponant in stabilirea identitltii meristemelor florale,Drecum si in controlul mirimii meristemelor.

GENOM]CA

Atr fost rnalizate genetic si norfologic o serie de rntrtante cu modificlri la nivelullocLrsului CI.AVATA. 5-a demonstrat faprul ci c/a I degradeazi srrucruramerisrerlului apical, prin anrplificarea alelelor slab exprirrrate, deternrinind oproliferare rr alelelor profunde. (4)

Au fost observate, de asentertea, cresteri ale nririmii prinrordiilor florale, instadiul de inigiere al organelor, precum si un grad crescut al nririnrii meristernelorflorale, corelat cu rrurrrirul de organe florale la alelele mutarrte. Au fost raportatecazuri in qrre alelele c/a / degradeazi structura merisremelor florale, prin dezvolmreaunor carpele spiralare, in interiorLrl gineceLrlui, generild patrLr carpele spiralate.

Au fost relatate interacqii geuice intre nrutantele c/a 1si alte 6 urutante. AstGl,a fost observat un feuotip nou ce se datoreazi interactiei intre rrutantele c/z 1 sia? 2, dp3, ?i si ng, indicind fapml ca c/a / aFecteazi structum meristeurelor florale,la nivelul cirora aclioneazi aceste gene. Courbinalii intre c/z / si ap -1 au ca rezultatrransfornarea centrului florii in tesut rrreristenraric, iar conrbiuatiile crr //, duc lao transfomrare cornpleti a florilor il l lstari.

Alelele rrrutarrte EMBRYONIC Fl.O\v/ER I (EMF I ) itiriaz.tinflorir ea fdri for-narea ulle; rozete foliare, Aceste rnutante formeazi papile srigrnatice si srructuride tip or-lle pe suprafaga cotiledoanelor lor, iar lEstarii nu produc fiunze in roz€rd, ciformeazi adesea structuri carpeloide, cu calacteristici de ovule, si care se rermini cuun pistil sau cu o 0oare (Castle si Sung, t995). Nelele nfl sr a{2 forneaz.L ftwtu)ip.

Ge:':,ele EMF regleazi negariv trecereir de la dezvoltarea vegetativi la ceareproductivi, precum gi expresia lui lP1, in resutLrl vegerariv. lnflorirea foartetinrpurie a rnutantelor ezf ndicl F.rptul cl genele ErllFrepreziuti represori centraliai infloririi, iar ciud activitatea lor scade sub un anumit prag critic, plantele trecde la dezvoltarea rozetei la cea a inflorescentei, si de la dezvoltarea inflorescentei,la formarea unei singure flori (Chen si colaboratorii, 1997). Muratiile co sigr careintirzie irflorirea nu au efect asupra ferrotipului clfla dublu nurante, ceea cesugcrexz.d ctr rolul acestor gene de control al timpului de inflorire este de a reprimafuncgionarea prodrrsului EMF, 5i cd, in absenqa genei CO sau a genei Gl tirrpulde inflorire este intirziat prin cresterea funcqiei genei EMF (lfleigel sicolaboratorii, 1995).

5. MUTATII ALE GENELOR CE AFECTEAZA SIMETRIA

Dintre nrutantele ce afecteazi simetria cele mai des intilnite sunt:Antinhinu.m tipul silbatic cu flori asintetrice :. Cycloideo si Dichotoma - flori abaxiale, cu simerie radiali

527

5rN \ ; l . N ( ) N 1 l ( . A

. Cyl:, l icho fircrori rmnscriprion:rl i onrologi c,.r l ictorrrl l ' l l l ,1, dc le IorLrnrb,a lc l tL r i t c l in 62 c ie anr i roac iz i

. centtortdi,lis sinterrie rrdialrt o flo,ire tcrnrinaiat

. Ar,.tbilopsis :

. y t tn PHA. \ lTA. i l l r .A l1 , , t i l r r r r r r i . r r r rc

. Gene.//- afectelzi sinretria, f lori lbcrrnre cu pozitie lbcraln, fbr-i clcfbrnrlte,l.r cerc lrpscsc olgarrcle flor:rlc, rLrnllre clc 20 notlrrri f j l lmcntolse si :rpoi l l tc f lor iaberilr)te.

Mrr(l l lc cc aficrc;rzri idottitrtca tlc olg:rl

Cele rrrri sttrdiarc nuavt lt Antblloptir lu fost cclc clre :ifccteazi lclcntirltelrde organ. Iclentit ' lrea orgrnelor f lorale csre spccificlr: i de prezenre r rrei clusc degcr te no t : r te A , B , C. ( f ig .3 ) Comtr inare l funcr ie i ce lo l t re i c lase dc genc , pcnrn lrtparirir l lstari lor si f lori lor, parc a fi suficient de specificl in iclerrrir.rrcr sid i fe len t ie rea organe lor f lo r r r le . ' l -oa tc .ccsre qcr )e sur r r coc l i f i c l re c lc hc to r itrlnscriprionali, clrc surrr specifici perruu ficcrrc orsiar f lor:rl.

Exisrentl l luraltrelor ce rtf icrexzi idenrirrtacir clc orgrl suqererzii c.iclczvoltlrerr f loli lor, este sculprari c1e qcrre selccrolre honreorice (gcnc dc it lentirarca orgauelot f loralc) I ciror explesic inclrrce rlercrnrirarel fornrarri ide orqane 0orrr]edifiLire icicntirrrt i i lor. Aceste genc por fi considerrre cx ircrivird cil un colruri lrorntajor al clczvolr:ir i i , carc acLiveazri inrlegLrl proqll lt gcnctic.

A losr propus trn nroclel runrir ,,nrode]rr] Al]C rirnprrLiu", care se bazeazl pesurel de cxpresie rle tipLrl ,,oz srru f ., a rrei gere <1iferirc a, / r l r., specifice ide nritrir i ii l pittfu olganc florale. De exerlplu, s-e presrrpus !rrmirorul nrodcl al exprcsieigeLrelor /, l ,c in <1ife'rire organe florale: ,,orr, oll, oJl it scplle, ,,0a, or, off in pcrrle,,,ofr on, ot' ir stanrine si ,,oJJ, oJl oi ' in crrrpele.

i l 1991, a lbs t p ropus ur a l r n roc ]e l , n r . r ru i r . .n roc lc l rL l c las ic ABC" , care a fosrit) lr)rre nrisrlri ircceprat pirl tcunr, s:i cxplice cirnr genele honreocice contlolclziiclertitrrea de organ (fig. 2).(20)

S inr i la r cu nrodc lL r l r in rpur iu ABC, rnode l t r l c las ic ABC s t rs r inc c i i r lenr i ra tea<ie organ in fiecare cerc estc cleternrinlt i priutr-o conrbilatie a activiL.it i i .r rrcigeue cLr iclentir:rte cle organ nunrire A, B, C.(20)

Clnd A [r.rnctioneazi singur;i, ea csrc rcspooslbilu clc identitatcl sepxlelor, A

5i B inrpreurl surt specifice pcrrrru perrle, iar B si C sunt rcsponsabilc dcdezvoltrrca stanrirelor. C- esrc responsabil cle dcz.voltlrea carpelelor, iar.A si C au[urcti irrtt lgoriste, in sensul cd lmlci cinrl aclionerlzri A, fLrnctia (] este bloclci,

(;1:_\( ),\ '11( .A i l9

cercult

lr i { . I - i \ ,1,){ lclLrl cl lsic i \ l i ( l pcrrru i( lcrrr ir .rrr:r dc o'q,r 'r l , r lntbi layis; ir lcnt i t :r tel r lc

, , r ' g . r n l l o l e l e cs r c spce i l l . i l i t p r i r r l i r nc t i i l c ho r r co t i cc ' \ , l l , l l , c . r l c su r r r l l c c ; t r t . r r r i r t i n

r lrrrrr ccr-cLri ut l i :Lccntet r\ speci l lci i I 'crt trLr rcIr lc, A si l l pcrrrnr pctulc, I ' i s i ( l s1'cei l icc

[)crrf i l r st i l rrr irrc si ( ] fcrrt lLr c.tr ' Iclc. i \ si ( l l l l l lcr ivir ir lc r l l l t i l l lol l is l i i .

i n pc r i an r ( se i r a l e s i p t r r l c ) , i a r ' ( l [ r l ochcaz , i A , l l n i i e ]u l o rgsne lo r de rep roc luce re

(s r l n r i ne s i ca rpe le ) . ( 2 )

De excrr plLr, AP 1 , pe l ingl roltr l siu iu inductia trtcl isrenrelor f lorale, intpreLr rr i

cLr funcrie {cnelor cl in clasa A, in cxle acestea sun! 6lnct ionale, este sol icir . tru petttLtt

spcc i f i c i r a ree i c l en t i l i r i i Fomr i r i i I i s l a r i l o r ' . Concon t i t e r c cu accs r dL rbLu f o l , AP I

Starlrirc

II C'aroelc

ITt lil

Pctale

"1I

Sepal

1l

&5 e 9 a n € c e t r p e ! !

l : ig. . t - N4rxlclLrl scrrcl, ,r AII( l si c\ l fcsir l Lcnrlor cLr

pe r r r ru i J cn r i t . r t ca pe te l c l o r ; i l + ( . s l ) cc i t l c c l c r r r r ui , l cn t i t a t c . r c r rpcLc lo r .

,r,ar:1fr ;' -' j ,

-',,Q; :,ltAi r,-,1

",^,fu) iur,iIETAUI AE\AUS

| \ u:/+aPl

- LFr->AG+4PI"',€l/,; tn+uro-nn' ' ll,6+tP2--i.4 6

i . ̂ .) ', i

dlti I ADJS,g

A64/;S

i t lcnt i tr tc clc orgirn. A+13 spccif icc

iclcrr r i tarce srirnrinelor; ( i pcrrtru

ii 'i,

\{llPISI'I.LATA

5 3{) ( ;E\ONItc , \

cs te in i t i i r l e \p l in r i l ta r l t n ive lu l n re l i s tc r re lo r f lo ra lc r inc ' re s i , r ta i r i rz i r r , l l n ivc ' lL r lind t rcer i i p r in rord i i lo r I renuu scp l l c s i pc ra le . ( ) t l ta gcnr l API cs re ac t iv l ra uv in r llo l to t in spec i f i ca lea ident i r i r i i c lc o rg l l l l l s ta r i lo r . N{ t r ra r i i l e l l r i ve lu l accsrc i

ceuc duc la nrociif iciri pos rrrr nscr;prio nlle, rrlnscripri l rrepLrrirrd fi localiz-atri.Celc cloui gcne sul! uecesitre si penrlu l irnctionarcir gerelor din clast B, qcrrcspec i f i cc pcn t r r r fo ln rarea pcra lekr r s i s r r in r i le lo r . A l te gc le i c le r t r i f i ca te in c las ltl strnt APLTAI.A 3 si l ' ] lS5l l l-A I 'A; cxprcsirr rccstol gcne are cl efccr fburrrreaper r le lo r s i s r r r r r inc lo r . (15)

C) alt i nrutrnti, PIIRIAN'fHlA, l{ectcazl organizurel f lor.rrl i , lcerrsrr rrrurlnr-rclrlctcrizinclir-se prin flori cLr 5 scplle, 5 Petllc, i stlrrrire si 2 carPe]e, conr}rrr '.rrivcLr t ipLL l sa lb : l r i c c t rc p fcz in ra l + sepa le , + pe t l l c , 6 s r rn r inc s i J c l rpe lc . ( f ig . i ) (5 )

,{lre rntrtanre ce rfccre:rzi i i lentiratea cle organ ,rLr fosr dc'scrisc irr rrlt inri i lnis i i l nurne nru t in rc le I iEVOLUTA s i TOUSI-L ID, c r r .c sc car rc re l i zcuzr f r in! -educerc : r tu tu ror o rg l le lo r la 4 sp i r . r le s i n tu ranra PIS l l l . l ,A ' fA , ce cupr . inc legenc responsab i le de c lezvo l t l l ca pera le lo r s i s t rn iue lo r . Exprcs ia P ISTI t . I ,ATAcsrc iodusa in srirdiul 3 rl inflofir i i (expresic rinrpulie), rpoi pini h anrere (cxpresic

tirzie).(i) Ger,t pitt i/ l ,t,t nLr csre necesani pcrrtru iniriercl fbrnlir i i prerl lelor, cicorrtrolcazi dolr strrcli i le rl lzi i ele clezvolcriri i petrlclor. l\.4utlrta se curacterizcaz:rprir) fofl l l lrca unui orgal i l rtrozaic, cxre afe tri isl itLrfi arlt de per;rle, cit si dcsePil]e, si crtlc Poare lezLt]ta clir srtprlPttrcre'rt ptogrrnrelor cirre l lctiot)elzi lt ut1xrunr i t n lonrcn t . j )e r t rn r dez- r ,o l t l r c l r rne i f lo r i nornr i r le , t rebu ie s . r cx i r rc o

c^ D4?*

tw)o

r l?o\ rI c(Do I\L()(?l/

\r/o

Flg. 4. A - l iprrls:rlbaticde floarc, Lr ,4 ra l., idopsis; B - nturtur't Puianthit; C-rl iagranrrrsi poz-itia orsareior l:r riprrl s:rlharic; L) - rliaqranr;r si pozitia or'ltiinclof le rrr v.rrra l)criattthia.

: l

i .

aoncor (Lr r f i i pe f i i c r l i r r r fe gene le c r rc cont ro le i rz r i n ron l . l rn l l in i r i c l i i p l in r , r l J i i l r r rs i i c lcn t i t . t te rL cuscr r r le i qcn ice .

( iL r exc t p t i l l L r i , {P l , ro l te gene lc A l l ( , s r r r r r p r r te ln i c conserver r i su n l sc . \ ' (n r cL lc ; \ l )N dc lp rox i r r r r r t i v 180 pc fcch ic lc Lnzc , r r rn r i re N lA l )S-box . , {ccsrc sccrc r r te

coc l i l i c . r l re r t t tu r lo rucn i i i l e legare ADN r t 1 l rc tL r l i l o l r r ' : rnscr ip r iona l i a i donr rn iL r l r r i

r \ L \ L )S-L l rx . (10)

. \L r l i r s t i c len t i f i ca te s i a l re gene in rp l i c i t t c in rnor fogeneza cerp . ' J . - lo r ' 1 : r

, l r , t l t i ,h t7 i i : . ( ,e r1 ,c lc le rcprez in ta r un i r i t i ( l c rcproc lucere fe ru i r inc s i r l c i rc l r r . lovLr lc l t c l l c pour r : i g in rc ro f i r l l l f . ' r r r in in s i c . l f c rs re lencr rx t de g ln rc tu l n r r rsc r r l in .

l or h ,lr,rlt ir lopsis mr ibst idenrif ic.rr.: qcnc c.lrc sur t responslbile i lr 'r lczvolrulels rn r l l ine lo f s i c : r r 'pc lc lo r . De exenrp l i r , eer ra A( ,A I IOUS (ag) cod i f l ca pL 'n t rL r u r l

l l c to r t r ' . rnscr i l , t io r te l rcspo ls lb i l pcnru ( l c l \1 ) l t i t fea 5 tanr i l ie lo f s i c l r 'pc l t lo r . ( l )

\ l r r r l t i i : r l c gcnc i AC-{ i \ lOL iS c le tc rnr in r i r tbs t r t r l s r ln r i r re lo r s i c l rpc le lo r ,

c lezvo l t r i rc r r lo r in loc t r l s t l rn inc lo f , c l inc l usu nr r r r in r l feno t ip c le . , fL t ,u t i t t f lo , r t t " .O. f ]oere nr r . r ran t l a le 10 pe t l le (+ no l r r , i l e , ( r i r r loc c le s t i ro r ine) , + sep l i l c s i i r tin re r io r t r l pc te lc lo l a l rc 10 pe ta le s i . i scpr r l c .

l .oc r rs r r l , r ,1 a f i rs t i c le r t i f i ca t i r c ronrozor t tu l -1 , gcn i i r re ce l pu t in 9 c ror i s i ,l i i n t ron i , iu r 1 , r 'oc lusu l p ro te in ic l re ce l pLr r i r r l . i8 ,1 "

" ,u i , ,o , , . i r l . \

l i o lL r l r \ ( lAr \ IOUS es te spcc i f i c in i c lcnr i r r r rc r r curpe le lo r s i inc l i lec r por r tc

l i rnc t ion l in r l ) rcun i cLL APF-T, \ l .A l . r l c tc rn t in r ' rn t l n lod i f i c i i r i l l n i t . ' l L t l

c . r r 'pc lc lL r r ' . ( l )I ' c . le : r l t : i l , , r r re , au los r iden t i f l c r t t c s i r t l re gcr te tes ; rcnsr tb i le de . lez . , r l tu rcu

c , r rpc l r lo l s i unr rn rc q tne le CR, \ l l5 C l l A \ \ ' s i 5PA ' fU l .A fA . ( l )N lL r ru r r rc lc ( l l {ABS Cl - { \ \ ' se c r r r - ' r c rc r - i zc r tz r t p r in r lezvo l ta re l L lnu i q inc .c t t n r ic

si l t loui cur'Pclc clc i iLzioneazli l ' .r l ivclLtl rt|cxtrlui. NltLtltnti i celei cLe a rioLt:r qcnt,

S i 'A"l LI Lr| l r\, sc cafrcLerizcrlzrl pr in rf-o rc(lLr.erc serti n if lcatir, i rr sti lLtltt i , sr ignrei

s i scpnr r r ru lL r i , in l c lna lLL l de fcc r rnd l ' c cs lc ?bscnt .

Ar r . i l i z . r dLrb l r r n rLr tan te lo r CTI / \BS ( l l .A \ \1 s i S iL \TULAI -A, c r r s i r r l to r

nrurilnfr cilre rl icctc:rzi clezloltarcl car'PclcLrr, l t lcnronstr-rr {:})tul cal genelc rrccsterl

cons t i ru ie o neces i f i l te in dezvo l t l rea carpc lc lo r ' . (2 ).{Lr l irsL i,, lcrrrif lcrrc si elte gene cu speciticit lre pcntru clirsa C, cunr er f. l genclc

l . t :U \ l (1 , c i r fe rL l fos t i zo la te s i c . t l l c tc r i z . t t c . I t c , .1e l l t i r pa t te , e \p r - ts i l qer re lo f

spca i i l ce ( lo l rcn iu lu i B esre , .1e r i sc r re r t t , t , : rc r i r l ta r de produs i i gc r tc lo f

SUI ) iN IAN (SUP) , qene care cor l i i i c : r pcn t rL r un produs care cont inu un nr ( r t i \

leLrc i rc - z iper s i rLn nro t iv z i rc - f ingc '1 . ( I ( r )ScLr.l i i rccertc ar.r clcnrorrstrlr f lprLtl c.i gcnelc cu iclcrtitate cle or-gln poc fi rcirl l tc

s i l l n ivc l cp igcnet ic . N le t i la rce c fonr l t inc i cs te in rp l i c l t r ' r i r t reg l l t c . r nc ' i i l l i \ ' i r l

ecrivirlt i i qenelol AG siAl3. I)lenccle tri lnsqcnice cu nivcl reciLrs al citozirrc' i trteri l l tc

nr . rn i l cs t i rc t i v i l r c r l cc top ic r i e gcnc lo l A l ) . i s i r \ (1 , la aces t o ive l . (17)

5a2 ( i l lN()MlcA

Existi numerosi cofictori carc nrodlrlerzii fi.rlctil gerrelot cu iclelrinrc de orglrr.Proteine ]vlADS-box au Fosr icle ntiflcrre llr Ar'bitlol,sit, clre por l)ere fodirneliz-acu produsi i Bele lor AG s i se por lcgr r r r v i r ro Je AOIr t . t tUt

Se poate spune cI rori produsii gcnelor ABC conrroleazi trlrscripria altor gcne(gene tinti) ai clror produsi sr.rnr clirecr sau indirecr irrrpliclti in llrnrlrea slu ilfuncqia acestor organe.

Recerrt au fost studiare noi firnctii l le gcnclor honrcotice; este vorba de unclegene care apartin unor srrbtanrili i a)e genelor lvl-A1)S-lxrx si irnune gcnelc AGl.2Jike.

Prezenta mernbrilor acesrei strbfirmilii de genc la cliverse plante cu flori sugercrzilci aceftia au o importanti cleosebiti si sunr;rurernic conservati, cx fur)crie.

llecenr, h nrodelul AIIC, s-a adluqat si secrorul D, la nivelul cirr.rir inducriagenelor FBP 7 s i FBP l l deternr in l for r r rarea ovule ior in per iant , la f lor i letransgenice cle petrrnie.

S-au ftcut unele stLrclii la planre transgenicc, in care expresia genelor AGl,2,si arrLrrue, FBP2 de perunie sau TOMATO box5 (TM5) de la tortl.e (l.ycopnsiottcsculcntuu)a fost inhibati prir co-supresie sau rchuologie anrisens si a cleterminatdezvoltlrea de flori lbermce, crL nrodificirrea cercurilor 2,3 si 4. derernrinindtranslorruarea homeotici ll orglne sepaloide. Pornind tle la aceste dare, studiilere:iizue la Arubidopsii au sugerar ci gerele AGL2-like actionezi ca rnecliarori inuerrreristenrele florale si genele cu ideurirare dc organ.(20)

Trei gene AGL2-like delt Atabiloptis, AGI-2, AGl."i si ACL9 sunt expr.inr.rre,pe cle o parte, in al doilca, al trcile:r si al patrrrlca cetc rl prinrordiului orglnelorflorale irr, pc de alri parte, AGL2 si AGl, 4 sunr exprinrarc de lseuenea, inexteriorLrl cercurilor de dezvokare ale florilor.

O singuri nruta[ie a ureia dintre cele rrei gene genereazi producerea unorfenotipuri subtile, in tirrrp ce rripla nrutaqie in care AG[-2, AGL4 si AGLg sLrntlipsire de fuucrie, are ca rezultate translormarea rururor organelor in sepale, iarflorilc devin are ledeterruinlte.

Aceste date indici fapruJ cd AGL2, AGl.4 siAGl-9 aLr fuuctii redunclanre caresLlor necesare per)rnr dezvoltarea pemlelor, stanriuelor si cnrpelelor si previu cresterernedeternriuati r organelor fl orale.

6. PRINCIPAIEI-E MUTANTE HOMEOTICEI^\ANTIRRHINUM MAJUS

Cercetiri privind genele homeotice s-au realizar si lt Antirrltinun ntjur, drroritigenorrrulrri nric, florilor nrari, propagirii vegerarive usolre, elenrentelor transpozabilebine caracterizate.

t i l

Ce le t l ru i L r i re car lc tc r i z l t c r ] ru t iu t re 1 tu los r cc le in rp l i c l rc in i c lcn t i t l t , :u r l corg ln , n lu t i r r te ce sc c i t f i l c te f i ze i t l . i p l i l r r ' - r t scns ib i l i r l r . : l , r conr l i r i i l c . l c n rc . l iL r .

r \u tbs t idcn l i f i c l t c r le i c lasc dc nr r r t r ln re : / / ) 1 , c l r , : . r lec tc rz -u .c rc r i l I s i l l . l corgane, r/4) { care afccrcrz-ir ccrcLrl III si l\/ clc ctrqaIc si 14, 11l, c.r|c l l icrcizic e r c L r l l l s i I I I . ( 8 )

O l l t i gc r i t in rp l i c r r r : i in i t l c r r r i t l c l dc o ls r r r r e .s r t ger r r l ) l r l r l ( - l l :N5 tz l , , / ' i 1c r t l c derer r r i r t r i ce ]u l t l c n rc r is tcnru l t r i l l o r ' : r l s i sc r ] i fe r r r r r i cze i r o rgunLr l po t l i v i r ,l l l oc tL I po t r i v i t . i \ ' 1 r r t : rn te le r /y ' sLrn t scLrs i t r i l c le r . r r r i . r r i i a le tcnrpcr r ru r i i . l ) c ,excntplrr, l l tcrttperarLrri de l(r C, nl!Ltanlel.- z1y' sc clrlcteriz-euzr'r prin pctl lcscpe lo ic le s i s t ln r inc c . r rpc lo ic lc , i r r r la 1 j "C r l czvo l r r r rcu t lo r i lo t cs tc r ro r - r ra l i r , c r rl l t ip r r l s r i lb , r r i c . (8 ) O r l ( i r n l r tanr i i es re CLOI IOSA, i r r i r r cc rc r . r l ( l sLr { i r i n r r r r r r r i c

{ :E I IA PI ,ENA.

ST\1-OSA s i F15 ' l U l . , \TA sur r dou i l n rL rnnrc in rp l i c l re in o lqanogcncz . rl lolt lat, l,t Artir l.t i tr lr- Accstea conuolel-za dcz-r.olurel nteristenrelor f lorele, prccLrnrs i i c lcn t in t tc r t c ic o rgnr t l qcnc lo l in rp l i cerc in , . lezvo l t , r l c , r f lo r i i . ( le lc doua l gcncy1, s i f i i sur r r p l r tc d in n rccrn isnrc lc c l rc in rP icc l i c l i cxPrq5 l l ec ro I i c r l l f i r r rc r i c i( i , i r t per i r t r t t , la t lo r i le t ipLr lL r i s r r lb r r t i c . ( - )

Totla Attt irrhinuu lurjrs :ru fost identif iclre nrurilr]te dc reglrfc r (lezvolrir i i

f lorrrle, CHORIPI.Ti\l-r\ si Dl,Sl)l lN fL{DO, chr si genc cle ntccli.rzri ciesre.l.rre.r

i lo r . r l l I IN IBRIATA. ( ( . l )

7. UN NOU MODEI, AI, IDENTITA'I-II ORGANEI-OR I.I,ORA]-F,

Estc volbrt dc al [)rrtru]tr nrodcl cnre incerlrcir sii explicc cLrnr clif i l i tc conrbinirri i

,r lc genelor horreoticc florl le (saLr produsii lor qcnici) spcciflci i idenriturerr orglnclor

florale, f i i l i referire ln ..f irrcti i lc honreoticc florrrle .

Acest rrrodcl sugercrlzll c:r prtrrr cotrrbin,rti i diferire,r I ltrLr profcif lc hon]coriccdifi 'r ire clctclruirtat iclcrrrit i tel l Pirrfu orglnc l lofl]e clifcrire. I)e lrez:r:rcestui nroclcl

sc cxplici iclcrrritatel celor patru ofqrrre: sepalc, pctale, carpe]e si strrntirte, ignoriincl

Pcnt rL i s in rp l i f i c l rc r cxp l i c i r ie i o r t r le lc s i o fgxne le ex tcnrc . Per r r rL r aceas t l t r t f i r s t

nevo ie de conrb iuar i i un ice a le gene]o f honrco t ice s ru l le p ro tc inc lo r .

Lz, Ar,tbit/oy,sis, ac.sre conrbinrlt i i se brtzcaza pe fbrntrtrerr x [)rtnl conrplcxe

prore in ice c l i fe r i te . l ) r in ru l , sepra le : , \P1- r \P i -? -? ; l l c lo i le , r , pc t r t le : A l )1 - - \P3-P l ' \ l r l ) ,

al trcilea, strrrriue: Al)l-PI-AC-.SIP, irr el p:irnrlea, crrpclc: AG-A(l-S Irl lSEf']. (prin

? se noteilzi l conrporlentc]e necrrrtoscrrre) (f lq4).

Aces te conrp lexe I ) ro re in ice , r ' cprez in t r luc to r - i t r l r t sc r ip t iona l i c i t re fo t c \c r ( i t - l

f i rncq i i p r in spcc i f i cerc r r l cgar i i l . t p ron to to r i i gene lor t in l l , carc s t tnL r t . r i r ' . t t r s . tLL

rcpresate fcnrfu specificrt|el dezvolrit i i cle ol 'sine florl lc cr-r idenririLi cl i lerirc.(10)

511 Gl lN( ) , \1 t ( l , \

l i i g . . i - . ,A1 +- lc r t r r ro r lc l " l l i r l cn t i r : r t i i o rg , r r rc l , , r i l t ' r , r le 1 t . lnL i laV: i t . . \ ccsr n ro t le lsugc fc . l z i r c i i pa tnr cor r rb i r r t t i i J i i c r i rc . r | . r r rL r I ro rc i r re l ton teo t ic t l l o r . r l c t l c rc r r r r i r l ii r l c r r t i t l t ca i l I ) r ru ( ) fganc f lo r l le , l i l e r i rc - i \ ccsrc cor ry r lc rc l ) r ' ( ) rc i l r i cc . c : r l c s rn r t , l . lu l r rtactori tr ' :rrrscriptiorrl l i , l .ot cxcrcit l l irrcti ir l()r If in slccil lci lr. l t lcg:uii l ir Ir 'onrorori rr qsrclort i r r r : r , c i r rc s rn ( f l cer r r ' c ac t i r i t t c ( i ) s l r r reprcs .L tc { - ) .

Spccificarea sclccriei gertelor t irrrri poutc fi rerrl izrrtrl pri l patfLr conrl)lcxc, lvindafirirr ' ir i r l i fcr' lre cle lcgere plin inrpercchcri la dit ir irc sccvcrrrc ADN (ploLrribil

CarG-bo.ttt) si prin rl isrriburirr crlrircrcrisrical ir i lcasrol irnpelcclrcri de 5c(verrc, inreg iu r rc i l p fonro tor l c l i l i : r i r . l< , r gene rn t l j .

An t . rgon isnrLr l i r t re f r rncr i i l c A s i ( l i r r n roL lc l r r l c l . rs ic r \ t | ( l p r , : r re f i cxp l i c r tp r in l lp t r r l c i c , - r r rp lexe le p ro tc in ice c l le conr i t A l ) l l cp reser iz i l e \ l r ! ' s ia gc l r . : lo f

AG, ia r conrp lexc lc c l fe cont i l A( i rep lescrz i r ger rc lc , \P l . Accs tc i r r re r ' . r . r i r 1 , , , rf i, cle rrscnrenea, corsiderate i lcl irecre.

' l 'cxr tc irrotcinelc homcotice tlorrle l lc clouerii lor' l \1AL)S .,cLrsicc" dc lr

Ar , tb i lop i , (APl , AP i , P l , . { ( i ) por i r r remcr ionr . . in v i t ro .S t t tc l i i recer tc r r r r r le ruons t l l r c i i conrp lcxc le p rorc in ice l le do nrcn i i l o l i r lADS

in ter lc t io re lz i c l i r cc r . De excnrp lu , F ,gcu-Cor r incs s i co l lbor l to l i i (21) rapo l rcaz ii lterlctia direcrri, ]r Attirrlt i trutt, inrre qcnclc cu icltrrritarc l)cr)tfLr nielistcnlclefloralc (SQUAT\1t)SA) si scrcle DLF -si Clt.O, din cercul B. Accrsr.t inrcr'.Lctie

es te ncccsar i pent lu s rab i l i l t r t f i l o r l x ie i cc rc t r lL r i o rg r rnc lo r f lon le , pc c le o p l lLe ,ia r pc dc l l ta , ace .s te in rerecr i i r r r loc la n ivc l p fo te in ic , L rnc lc D l - l r , ( i l ,O s i S{ ]L iAlornrelzi conrplcxc ruulrinrcrice. Afinirarca cle Iegalc l ADN l:r acesre conrplcxecliferl plin dinreri inclividLrali. ALrrori isuqerelza un rroclel iu clrc rrcesre conrplexeprorcinice suut in rcirl irarc plorcine rcrrirrrrerice, conrpuse clirr hc rerod irrrc lLLl

DEF-( I l .O s i i ronrod in reru l SQUA-SQU \ . i , r . rcer r r . r , . r , r re r , . l i n rc r i i DEl . - ( l l .O

si SQLJA-SQUA rccurtosc clif ir ite secve nte ADN, nLrnire CarG-boxes (ele nrcnre

de secvenre ADN), CCA- (boeate )CC.

j ,

i i 5

L) r rca fo rnr l rc l . rces tor conrp l rxc r ' . r l l cor rs t r l r r r r i l : r i l i { i . r i t c spec i i cLe p lunrecil 11ori, csrc f,-l,trte us,r' . lc expliclt ci inrl anLrntirc Plorcinc tlc ln,1rrl. ')r lo1,tt i, t1ecxcr rp lL r , r \ l )L s i ; \P-1 , in rc t l c t ionc lz r i i r t r i r lo , . la r r r r r f i r rn ru tz r r c l i r r r l i r l c leg . r reA L ) \ ,

. \ s r fe l , c r t r r rc tc l i ze r -cu conrp lcxe lo r - r r r r l t in rc l i ce I p rorc i r re lo r \ l \DS 1r<r : r refc l ) fcz .n ( .1 un pLrncr in i r r rc legcre . i in rc r ' . rc r i c i i r r r l c gcr r r l c hor r reor ic r t lo r l l c .qJ i )

8. CAII,ACTF]IUSTICI GENERAI,E ALI-, GEN I-]LOR HOMIiOTICE

l. 5e corsicleri crl gcn(le honr.oricc crrnGrri l iccarei cclLrlc o nrerroric ri or-gunclorpc cltr-e le \, i l lofntrL. Acclsr] nrcnroric sc Po.ite realizlt P|in :rrrroretl ltr 'ca gcrtclctrfcsPr'crifr.

f . ( , cnc lc honrcor icc sunt rL l ronon le , c l in p r rnc t r l c vedc lc l1 l c r i r rn i i lo r . Oce l l r l l i se v l cor r l )o r r r r i l r i r co f ( l cu qcnot ipLL l s r i r r l ton ieor ic in r l i l i re r r r L lc ge lo r ipu lccJr r le lo l i r t con j r r r ' f r ro l l c .

i . O ce lL r l i l r c nevo ic r l c o in lb r rner ic c le foz i t i c pen r n r a r r i s f un( ie L r n u l senr n t lhonrco t ic . 5e cons ic lc r : i c r i cc lu lc l t ce e rpr - in rar . rcc le ls i qenc honreot icc . i r rc r l i r rn rd i l c r i rc l l c c r rb l ionu l r r i sc po f c . lupor t i d i f c r i t , in L r rn l i ro r i re ]e c i rc r rmsfxnrc :

I r ro tc i l l c l c hor lco t ice sunr s in tc t i z r rc i i r concer l r r r r i i c i i i e r i re , in f iec l r -c r iP ce l t r l r r r ,rc i i l i r i r rca ( l c conrb ina t i i d i leL i tc : i l c p rorc iue lo r honrco t ice , f l cc l rc cornb iuur ie cc . l r l c te r is r i c i f iec i re i cc lL r le , cx is rcnr . r L r ro r ib r l rc r r ro lccu l r r re J i fe r i t c l leprorc i re lo r honrcor ice , f i cc l re f i r rn r r i f i i r rc l fo rnn c l lac rc r is t i c l L r r tc i cc l rL lc d i l r r ,or rnLLnr i r i poz i r ie . ( l r in< l . rccs te fo r r re p lo re in icc sur r r f i r l c t ione l t l l nsc l ip t ion l le ,clc frot sar controlcz-c clif i l i t nr.ri nlulrc qcrle srrLr rrt icteuz-ri difcrit rrcec.r' i gcn.r.

+ . Gcnc l r ' hor t tco t icc cont fo le r lz . i i c l c r r r i r l t cu segnrcnre lo r en tbr ion l le .5 . Sc nrc r i t inc rnenr l ie cc l rL le lo r - in d i fc r i re scgr ) le l l rc s r lu p i l f i l segnrenre

c l l lL ) r lon i l re .