8/6/2019 Microscopie_electronica

1/17

MICROSCOPIE

ELECTRONICA

1

8/6/2019 Microscopie_electronica

2/17

puterea cea mai mare de rezoluieputerea cea mai mare de rezoluie

a unui microscop optica unui microscop optic == 0,20,2

2

8/6/2019 Microscopie_electronica

3/17

Principiul M.E.

1924 De Br1924 De Brogliogliee -- comportareacomportareadualist undadualist unda -- corpuscul acorpuscul a

particulelor ncrcate electric .particulelor ncrcate electric .

D = / N x sinD = / N x sin

=h /M * v =h /M * v

3

8/6/2019 Microscopie_electronica

4/17

4

8/6/2019 Microscopie_electronica

5/17

Microscopul electronic de

transmisie

5

tunul electronic estetunul electronic estesursa electronilor desursa electronilor deinalta energie , lentileinalta energie , lentileelectromagnetice ,electromagnetice ,

camera in care secamera in care seintrodce preparatulintrodce preparatul

lentila proiectorlentila proiector

ecranul fluorescent peecranul fluorescent pecare se formeazacare se formeazaimaginea.imaginea.

8/6/2019 Microscopie_electronica

6/17

Principiul MET

Electronii care strElectronii care strbat preparatul suntbat preparatul suntdeviai n funcie de grosimea ideviai n funcie de grosimea idensitatea preparatuluidensitatea preparatuluistructurile mai dense vor produce unstructurile mai dense vor produce un

grad mai mare de dispersie agrad mai mare de dispersie aelectronilorelectronilor zone electronodense,zone electronodense,

mai ntunecatemai ntunecatestructurile mai subiri vor permite ostructurile mai subiri vor permite o

treceretrecere mai uoar a electronilormai uoar a electronilor

zone electronoclarezone electronoclare6

8/6/2019 Microscopie_electronica

7/17

Interactiunea electroni-preparat

7

8/6/2019 Microscopie_electronica

8/17

Caracteristicile M.E.

Puterea de mPuterea de mrirerire

P

uterea de rezolutieP

uterea de rezolutie

Puterea maxima de marire utilaPuterea maxima de marire utilaeste de aproximativ 1 milion de ori.este de aproximativ 1 milion de ori.

8

8/6/2019 Microscopie_electronica

9/17

C

aracteristicile M.E.Puterea de rezoluiePuterea de rezoluie Teoretic, puterea maxima deTeoretic, puterea maxima de

rezolutierezolutie==11-- 2 .2 .

11 = 10= 10--1010

mmPractic , puterea de rezolutie estePractic , puterea de rezolutie estede 1/ 10 din grosimea sectiuniide 1/ 10 din grosimea sectiuniiexaminateexaminate ~~ 60 .60 .

9

8/6/2019 Microscopie_electronica

10/17

C

aracteristicile M.E.Numai pentru preparatulNumai pentru preparatul

microscopic permanent!microscopic permanent!

Imaginea finala esteImaginea finala este

MONOCROMAMONOCROMA

zone electronodense sizone electronodense si

electronoclareelectronoclare10

8/6/2019 Microscopie_electronica

11/17

11

8/6/2019 Microscopie_electronica

12/17

ETAP

ERecoltareRecoltare

FixareFixareDeshidratareDeshidratare

ClarificareClarificare

ImpregnareImpregnare

IncluzieIncluzie

SectionareSectionareDiferentiereaDiferentierea

structurilor prinstructurilor prin

contrastarecontrastareMontare peMontare pe

grilagrila12

8/6/2019 Microscopie_electronica

13/17

Criterii pentru aprecierea unei

imagini corecteAbsena spaiilor astructurateAbsena spaiilor astructurate

Continuitatea membranelorContinuitatea membranelor

Aspectul particular al unor organiteAspectul particular al unor organite

Aspectul general este acelai de fiecareAspectul general este acelai de fiecaredat, indiferent de fixatorul sau metodadat, indiferent de fixatorul sau metodafolositfolosit

13

8/6/2019 Microscopie_electronica

14/17

MICROSCOAPE ELECTRONICE

MicroscopulMicroscopul electronic cu baleiajelectronic cu baleiaj sausauscanning.scanning.

imagini tridimensionale ale suprafetelorimagini tridimensionale ale suprafetelor

celulelor, tesuturilor sau chiar a organelorcelulelor, tesuturilor sau chiar a organeloracelai principiu al interaciunii cu unacelai principiu al interaciunii cu un

fascicul de electronifascicul de electroni importani pentru obinerea imaginii suntimportani pentru obinerea imaginii sunt

electronii reflectai pe suprafaaelectronii reflectai pe suprafaapreparatuluipreparatului

14

8/6/2019 Microscopie_electronica

15/17

MICR

OSC

OPI

E DE BALEI

AJ

15

8/6/2019 Microscopie_electronica

16/17

I

ngheare - fracturare Permite vizualizarea suprafeelorPermite vizualizarea suprafeelor

rezultate prin clivajul anumitor structurirezultate prin clivajul anumitor structuri

(ex: clivajul membranei celulare)(ex: clivajul membranei celulare)se realizeaz un mulaj metalic sau dese realizeaz un mulaj metalic sau de

carboncarbon

16

8/6/2019 Microscopie_electronica

17/17

Ingheare - fracturare

17