Dr.Ariela-Ligia OLTEANU

Proliferarea de celule mieloide maligne(clonala) cu conservarea unei maturatiei (cel putin in faza cronica)Clasificare: WHO policitemia vera PV leucemia granulocitara(mieloida) cronica Ph+ LGC/LMC leucemie cronica cu neutrofile sindromul hipereozinofilic trombocitemia esentiala(hemoragica) TE/TH metaplazia mieloida cu mieloscleroza (mielofibroza primara) MMM/MP sindroame mieloproliferative neclasabile Din 2008 in clasificarea WHO: PV, MP,TE ,(Ph-)se clasifica cu denumirea de neoplasme mieloproliferative

Snge i/sau M.O.*)

Bl < 15-29% Bl + Pro 30% Bazofile 20%a. Faza cronic:

Leucocitoz cu formul leucocitardeviat la stnga Bazofilie absolut (

c. Faza blastic:

Febr > 380C, peste 7 zile Deficit ponderal > 10% Creterea splinei cu 25% Fibroz reticulinic n M.O. Anemie, trombocitopenie Anomalii citogenetice adiionale Tumori blastice extramedulareSnge i/sau M.O.*)

Bl > 30%Dup:Butoianu E, Niculescu-Mizil E, n Tratat de Medicin Intern (Hematologie,vol.II), sub redacia R. Pun (Edit. Medical Bucureti), 1999, p. 133.Kantarjian H & colab, N.E.J.M., 2002, 346, 645*)

Cromozomul Philadelphia(Ph1) este prezent in 95% din cazurile de LGC (prima anomalie cromozomiala identificata in cancer)Este o anomalie citogenetica clonala, castigata, rezultatul unei translocatii reciproce, echilibrata, intre Cr 9 si Cr22 t(9:22);schimb de material genetic intre bratele lungi ale cromozomilor 9 si 22Anomalia moleculara : juxtapunerea situsului oncogenic Abelson(abl) situat pe Cr 9 si a regiuniimajor breakpoint cluster region(bcr) de pe Cr 22Gena de fuziune, hibrida, rezultata bcr/abl duce la sinteza de unui ARN mesager chimeric si la o activitate kinazica crescutaProliferarea clonei bcr/abl antreneaza o expansiune a compartimentului mieloid si supresia hematopoiezei normale

Tehnica: celulele medulare, recoltate prin aspirat medular,sunt cultivate 48-72 ore pentru a obtine un numar important de celule in mitoza; sunt blocate apoi in metafaza, cu colchicina, dupa microfotografiere cromozomii fiecarei perechi(1-23) sunt etalati pentru a fi analizati in raport cu un cariotip normal

Southern-blot ; utilizarea unei sonde specifica pt bcrHibridizarea in situ cu fluorescenta FISHPT-PCR : dupa extractia ARNm, ARN-ul este retro-transcris cu ajutorul revers transcriptazei in ADNc simplu catenar specific pt bcr/abl;apoi se efect PCRPunerea in evidenta a unui transcript de fuziune prin PCR este un element capital pentru diagnostic si pentru supravegherea pacientului

2x107 celuleIZOLARE ARNIZOLARE CU TRIzol

METODOLOGIA LIGHTCYCLER RQ-PCRNr copii Bcr/AblPCR CALITATIV MULTIPLEX PCRTipuri de transcript Bcr/Abl