7/25/2019 Histo_LP1

1/15

UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE CRAIOVA

PREPARATUL HISTOLOGIC

7/25/2019 Histo_LP1

2/15

PREPARATUL HISTOLOGIC

1. Recoltarea- se poate face de la animale de experienta, de la pacienti inviata si de la cadavre. Ea trebuie efectuata cu maxima operativitate, pentru a

preintampina autoliza celulelor din fragmentul de tesut.2. Fixarea- are drept scop oprirea proceselor alterative post-mortem lanivel celular si tisular prin blocajul reactiilor enzimatice. Fixatorii pot simpli(formolul 10 - durata xarii 1-! zile" sau compusi (#rt$ - bicromat depotasiu % sulfat de sodiu % formol, &ouin - acid picric % formol % acid aceticglacial, 'arno - alcool % cloroform % acid acetic glacial") pentru o bunaxare, raportul volumetric intre piesa si xator trebuie sa e cuprins intre1*+0 - 1*0.3. Includerea la ara!na"comporta mai multe etape - des$idratareaalcoolul etilic, in concentratii crescande, extrage apa din tesuturi (bai cualcool de 0, /0, 0 si ") dureaza cca. 2-! ore. - claricareaeliminareadin piese a alcoolului etilic, nemiscibil cu parana (bai succesive de benzen,

toluen, xilen) piesele se mentin in ecare baie un timp variabil, de la !0 minla 1- ore, in functie de marime" - paranarea se realizeaza prin introducereapieselor in bai de parana pentru a se impregna cu aceasta (1,-2 ore, ! bai".

7/25/2019 Histo_LP1

3/15

Tiuri de !xati#i $%n &unc'ie de ac'iune()

3enaturan4i (coagulan4i" metanol, etanol, acid acetic

'u func4ie aditiv5 alde$ide, carbodiamide

'u func4ie mixt5 cloruri mercurice

7/25/2019 Histo_LP1

4/15

*ecani+,ul !x-rii

6nul din cei mai cunoscu4i xatori,formalina, xeaz5 prin formarea de pun4imetilenice 7ntre reziduurile peptidice

7/25/2019 Histo_LP1

5/15

. Sectionarea)se realizeaza cu un dispozitiv mecanic de mare precizie,actionat manual sau automatizat, dotat cu un cutit care culiseaza peverticala, numit microtom) sectionarea se realizeaza la !- 8m grosime.9ectiunile obtinute se etaleaza pe lama portobiect folosind o baie de apa la!:-+0' si se lipesc de aceasta cu ajutorul albuminei ;aer

/. Colorarea

7/25/2019 Histo_LP1

6/15

Prele#are te+ut

Fixare9ectionare?ibratom(!0-0 @m"

7/25/2019 Histo_LP1

7/15

*ICROSCOPUL FOTO5ICCU LU*I5A TRA5S*ISA

artea ,ecanic- $+tati#ul( este format5 dintalpa (piciorul)coloana - este ataDat5 la picior Di con4ine

platina (msua)tubulrevolveruldispozitivul de punere la punct format din viza macrometric Di

viza micrometric.artea otic- esteformat5 dinsistemul ocular dou5 lentile montate 7ntr-un tub metalic ce se introduce 7n parteasuperioar5 a tubului ( x, /x, 10x Di 1x".sistemul obiectiv asocia4ie de lentile montate 7ntr-un tub metalic ce se ataDeaz5 lacapul revolver ( x, 10x, 20x, +0x Di 0x"+ur+a de &otoni 6i di+o7iti#ul de tran+,i+iecuprindesursa de lumin - bec de ?, alimentat de la transformator.dispozitivul de transmisie oglind5 plan5 cu rolul de a orienta razele luminoase 7n axuloptic.condensorul de lumin sistem de lentile, montat sub platin5, cu rolul de a focaliza

lumina pe preparat.

7/25/2019 Histo_LP1

8/15

7/25/2019 Histo_LP1

9/15

Tenica de lucru) se pune 7n func4iune sursa de lumin5) se aduce 7n axul optic obiectivul 10x) se coboar5 condensorul pGn5 la ob4inerea unei lumini uniforme Di de

intensitate mare) se xeaz5 lama portobiect pe platin5, cu ajutorul vale4ilor) cu ajutorul vizei macrometrice, se coboar5 tubul pGn5 la o distan45 mai

mic5 de 1mm (distan4a focal5 a obiectivului 10x") se xeaz5 distan4a interpupilar5 prin apropierea sau 7ndep5rtarea celor

dou5 oculare)

privind prin ocular, se ridic5 tubul cu ajutorul vizei macrometrice pGn5cGnd apare imaginea. >rin miDcarea vizei micrometrice se ob4ine o imagineclar5 Di luminoas5)

7n timpul examin5rii se va 4ine 7n permanen45 mGna pe viza micrometric5,7n vederea men4inerii unei imagini clare 7n timpul deplas5rii cGmpului)

cu ajutorul celor dou5 vize de pe partea lateral5 a platinei se va miDca

lama cu preparatul pentru a se examina 7n totalitate) se roteDte revolverul pentru a aduce 7n axul optic celelalte obiective (20x,

+0x, 0x". la utilizarea obiectivului 100x (cu imersie" se ridic5 la maximum

condensatorul Di se desc$ide complet diafragmul iris) pe preparatul xat sepune o pic5tur5 de ulei de cedru Di se coboar5 tubul pGn5 cGnd lentila

frontal5 a obiectivului a f5cut contact cu pic5tura de ulei.

7/25/2019 Histo_LP1

10/15

e,atoxilina 8 eo7ina e+te cea ,ai &rec#enta colorati&olo+ita in i+tolo9ie +i atolo9ie $4icro,a(

7/25/2019 Histo_LP1

11/15

e,atoxilina 8 eo7ina e+te cea ,ai &rec#enta colorati&olo+ita in i+tolo9ie +i atolo9ie $4icro,a(

(acizii nucleici" A-'##H A-'##I

Hematoxilina (solutia nala contine atomi de =l sau Fe, denumiti Jmordan =l =l2%

-Hematoxiline cu Fe Leigert, Heiden$ain, ?er$oeM, Noez

- Hematoxiline cu =l Harris, ;aer, E$rlic$, 'arazzi, Oill

(aminoacizii" A-PH2 A-PH!%

Eozina ionizeaza negativ in solutii apoase

He,atoxilno!l : 4a7o!l : al4a+tru

Eo7ino!l : acido!l : ro+u

7/25/2019 Histo_LP1

12/15

HE;=Q#R

7/25/2019 Histo_LP1

13/15

eriodic acid Sci= $PAS(

;ucopoliza$aridele neutre din

celulele caliciforme,glicogenul, membranelebazale, brele de reticulin5,ro6u #iolet

Al4+tru de toluidina

Oranula4iile mastocitelor($eparin5, $istamin5" #iolet

$,etacro,a7ie(Fondul (nucleii" al4a+tru$ortocro,a7ie(

7/25/2019 Histo_LP1

14/15

I,re9na'ie ar9entic-

Fi4rele de reticulin-