+ All Categories
Home > Documents > F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu...

F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu...

Date post: 01-Feb-2018
Category:
Upload: truongthuy
View: 252 times
Download: 5 times
Share this document with a friend
12
Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae la nou-nascuti: valoarea investigatiei microbiologice moleculare Brindusa-Elena Lixandru 1 , Codruta Romanita Usein 1 , Maria Condei 1 , Daniela Cristea 1 , Elena-Carmina Dragulescu 1 , Ileana Luminita Coldea 1 , Felicia Antohe 2 , Irina Codita 1,3 1 INCDMI Cantacuzino, Bucuresti 2 IBPC “N. Simionescu”, Bucuresti 3 UMF “Carol Davila”, Bucuresti
Transcript
Page 1: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

FFocar de infectii nosocomiale cu Klebsiella

pneumoniae la nou-nascuti: valoarea investigatiei microbiologice

moleculare

Brindusa-Elena Lixandru1, Codruta Romanita Usein1, Maria Condei1, Daniela Cristea1, Elena-Carmina Dragulescu1, Ileana Luminita Coldea1,

Felicia Antohe2, Irina Codita1,3

1INCDMI Cantacuzino, Bucuresti2IBPC “N. Simionescu”, Bucuresti

3UMF “Carol Davila”, Bucuresti

Page 2: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013

Klebsiella pneumoniae : introducere Klebsiella pneumoniae : introducere Caracteristici :

> Enterobacteriaceae

> Bacili Gram-negativi

> Oxidaza-negativi

Aero-anaerob

Imobil

Tractul digestiv al omului (30%) si al animalelor

3 subspecii: subsp. pneumoniae, ozenae, rhinoscleromatis

Testarea sensibilitatii la antibiotice :« Grupul 2 » de Enterobacterii: producerea naturala de penicilinaza de nivel scazut (SHV-1 cromozomala) inhibata de acidul clavulanic si tazobactam

Rezistenta naturala la: aminopeniciline (ampicilina, amoxicilina) carboxipeniiline (ticarcilina), ureidopeniciline (piperacilina)

Fara rezistenta naturala la C1G, C2G, carbapeneme, aminoside, quinolone, TE, C, SXT

Page 3: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Klebsiella pneumoniae : impactul clinicKlebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi, diabet,

alcoolism, pacienti cu dispozitive invazive, nou nascuti

Tractul urinar si respirator: cele mai frecvente situsuri de infectie

Raspandire rapida prin mainile personalului medical

A -2 a cauza a septicemiilor dupa E. coli

Rata de mortalitate crescuta

Focare cu tulpini rezistente (BLSE), diseminare clonala

Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013

Page 4: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Klebsiella pneumoniae: mecanisme de rezistenta la Klebsiella pneumoniae: mecanisme de rezistenta la beta-lactaminebeta-lactamine Producerea de β-lactamaze: mecanismul principal de rezistenta

la β-lactamine la bacteriile Gram-negative. plasmide cu gene de rezistenta BLSE (beta-lactamaze cu spectru extins):

Prima BLSE descrisa la o tulpina de K. pneumoniae (1983) BLSE derivate din penicilinze TEM, SHV, prin modificarea 1 sau 2 aa din

situsul activ al enzimei Dupa 2000 CTX-M un grup nou BLSE cu raspandire modiala E. coli ++++, K

pneumoniae, Salmonella typhimurium, Proteus mirabilis

Cefalosporinaze plasmidice (ex: CMY-2): achizitia de gene de tip AmpC prin intermediul plasmidelor de la speciile natural producatoare (Enterobacter, Serratia, Morganella, Citrobacter freundii)

Carbapenemaze: KPC+++, VIM,NDM, OXA-48

Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013

Page 5: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Obiectiv:

Investigarea unor tulpini izolate dintr-un focar de infectii nosocomiale intr-o sectie de nou-nascuti

Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013

Page 6: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Material si metode

• 8 izolate clinice8 izolate clinice• Provenienta Provenienta

– 2 nou- nascuti 2 nou- nascuti • Prelevate clinice: Prelevate clinice:

– Hemocultura Hemocultura – Secretie pulmonara/traheobronsicaSecretie pulmonara/traheobronsica– Secretie nazalaSecretie nazala– Exsudat faringian Exsudat faringian

Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013

Page 7: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Material si metode• Confirmare diagnosticConfirmare diagnostic

Metode conventionale: teste biochimice “in Metode conventionale: teste biochimice “in house”house”

Metoda automata VITEKMetoda automata VITEK Testarea sensibilitatii la antibiotice:Testarea sensibilitatii la antibiotice:Metoda disc difuziei Kirby Bauer (CLSI): Metoda disc difuziei Kirby Bauer (CLSI):

amoxilcilina, amoxicilina+ acid clavulanic, ticarcilina, piperacilina, piperaclina + tazobactam, cefalexin, cefuroxim, cefixim, cefotaxim, ceftazidim, aztreonam, ertapenem, imipenem, gentamicina, tobramicina, amikacina, acid nalidixic, ofloxacin, ciprofloxacin, tetraciclina, cloramfenicol, trimetoprim / sulfametoxazol

Test de sinergie dublu-discTest de sinergie dublu-discDetectare gene prin PCR : Detectare gene prin PCR :

blaCTX-MblaCTX-MblaTEMblaTEMblaSHVblaSHV

Page 8: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Material si metode

Tipizare : – Metode fenotipice:

• Lizotipare• Antibiotipare

– Metode moleculare:• Electroforeza in camp pulsator (pulsed field gel

electrophoresis = PFGE) a fragmentelor de ADN genomic obtinute cu enzima de restrictie XbaI

Page 9: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Rezultate - teste fenotipice

Toate cele 8 tulpini au fost confirmate ca fiind K. pneumoniae

Toate tulpinile au prezentat acelasi pattern de sensibilitate / rezistenta: R: AMX, TIC, PRL, CXM, KF, CTX, CN, SXT I: AMC, CFM, CAZ, NA S: TZP, IMP, ETP, ATM, AK, TOB, CIP, OFX, C, TE

Fenotip BLSE

Toate tulpinile au fost lizorezistente (netipabile prin lizotipie)

Page 10: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Rezultate - teste moleculare

CTX grup1 (CTX-M-15++++?)

SHV TEM

Rezultate PCR1 2 3 4 5 6 7 8 M+ 1 2 3 4 5 6 7 8 M+ 1 2 3 4 5 6 7 8 M+

Legenda1-8– tulpini K. pneumoniae 9- martor pozitiv10–martor negativ 11- apa12- marker greutate moleculara

Page 11: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Rezultate-teste moleculare

Legenda:1,6,11-Salmonella ser..Braenderup H9812

2 - 5, 7 -10- tulpini K.pneumoniae

Rezultate PFGE

Similaritate 100% a profilurilor obtinute - clonalitatea si inrudirea epidemiologica a tulpinilor

Page 12: F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae de infectii nosocomiale cu Klebsiella... · Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi,

Concluzii

• Utilizarea metodelor fenotipce si moleculare a permis confirmarea unui focar de infectie nosocomiala care a evoluat intr-o sectie de reanimare nou-nascuti.

• Analiza PFGE reprezinta ”gold standard” pentru demonstrarea clonalitatii tulpinilor din focar


Recommended