Competente microbiologie – virusuriSub.7 : Markeri serologici in suspiciunea de hepatita virala

cronica cu VHB

VHB prezinta :-Ag de suprafata = Ag HBs (prezent in anvelopa virusului )-Ag de miez = Ag HBc (din nucleocapsida )-polimeraza = Ag HBe (din nucleocapsida )

Ag HBs si Ag HBe pot fi detectati in ser , in timp ce Ag HBc e present doar in hepatocite . Aceste antigene , impreuna cu Ac corespunzatori ( Ac anti HBs , Ac anti HBe , Ac anti HBc ) reprezinta markeri ai infectiei cu hepatita B .

Ag HBs → Ac antiHBsAg HBc → Ac antiHBcAg HBe → Ac antiHBe

Ag HBs = este primul marker care apare in serul pacientului dupa contactul infectant si semnifica infectiozitatea sangelui in boala acuta , boala cronica si in starea de portaj . (*boala cronica = atunci cand Ag HBs persista in ser mai mult de 6 luni )

(*stare de portaj = purtator sanatos , prezinta Ag HBs , dar nu prezinta simptome, risc de anturaj )

Ac antiHBs = ultimii care apar , sunt protectivi fata de o noua reinfectie si pot apare dupa o hepatita acuta cu VHB sau postvaccinare . (indica imunizarea )

Ag HBc = NU SE GASESTE IN SER (se gaseste in hepatocit ) .

Ac antiHBc = Pot fi de tip IgM sau IgGIgM – Pot apare in infectia acuta sau recenta sau reapar in acutizarile formelor cronice.IgG – au rol anamnestic (de memorie )

=infectie acuta , recenta sau reactivarea unei hepatite cronice

Ag HBe = prezenta sa in ser sugereaza replicarea activa a virusului si deci prezinta contagiozitate periculoasa prin sange si secretii .

Ac antiHbe = sugereaza un potential infectios al sangelui cu evolutie spre vindecare .

Hepatita acuta cu VHB = presupune prezenta de Ag HBs , Ag HBe , Ac anti HBc de tip IgM si Ac anti Hbc totali.

Purtator sanatos = prezinta transaminazele normale si deasemenea prezinta Ag HBs si Ac anti HBe totali prezenti peste 6 luni in serul pacientului .

Hepatita cronica cu VHB = presupune cresterea valorii ALAT de 2,5 ori peste valorile normale ;

= prezinta AgHBs , Ag HBe , si Ac anti HBc totali prezenti in ser peste 6 luni .

1

Vindecare cu imunizare = presupune prezenta de Ac anti HBc totali , Ac anti HBe si Ac anti HBs .

Status post-vaccinare = sunt prezenti doar Ac anti HBs .

Markerii serologici in hepatita virala acuta si cronica cu VHB

Ag HBs Ac anti HBs Ac anti HBc AgHBe Ac anti HBe

Hepatita acuta

+ _ IgM + _

Hepatita cronica

+ _ IgG + _

Asadar , diagnosticul hepatitei cu virus B impune coroborarea metodelor de diagnostic :

a)direct –prin evidentierea de Ag HBs , Ag HBe (ELISA) si Ag HBc (in hepatocit prin M.E )--evidentierea AND VHB prin PCR

b)indirect –evidentierea Ac anti HBs , Ac anti Hbe, Ac anti HBc (ELISA

HEPATITA ACUTA CU VHB HEPATITA PERSISTENTA CU VHB

2

Sub.8 : Markeri serologici in suspiciunea de hepatita virala cu VHA

Anticorpii IgM anti –VHA persista 2-4 luni si semnifica infectie acuta sau recenta . Anticorpii IgG anti VHA sunt persistenti si semnifica boala in antecedente . Depistarea Ac anti-

VHA o facem prin ELISA .

Un rezultat –Ac anti-VHA/IgM(+) cu anti – VHA totali (+) semifica infectie acuta - Ac anti – VHA/IgM(-) cu anti- VHA totali (+) seminfica trecerea prin boala sau cu

imunizare .

Dg. Direct- este apanajul cercetarii ptr ca virusul este prezent in sange si in materii fecale cu 2 saptamani

anterior debutului bolii si 1-2 saptamani dupa disparitia icterului .- la metode de diagnostic direct se realizeaza izolarea VHA si evidentierea virionilor in materiile

fecale prin imunomicroscopie electronica .

Dg. Indirect –ELISA- Ac anti VHA /IgM + --Ac anti VHA totali (IgM + IgG) + + ~~~~~~~~~~ ~~~~~~~~~~~~ Hepatita Trecere prin

acuta boala cu imunizare

!!!!! HEPATITA A NU CRONICIZEAZA NICIODATA!!!!

3

Sub.9 : Markeri serologici in hepatita virala cu VHC

Detectarea genomului VHC prin amplificare genica (PCR) confirma boala in caz de rezultate serologice echivoce .

Diagnosticul de hepatita C se bazeaza pe prezenta anticorpilor serici anti-VHC .Evidentierea anticorpilor anti-VHC se realizeaza prin teste ELISA confirmate prin RIBA

(Recombinant Immuno Binding Assay ) prin care este stabilita si clasa Ac reactanti .

Dg. Direct ARN-ul virusului C se detecteaza prin tehnici de biologie moleculara (RT-PCR) ; Sunt posibile teste calitative care confirma boala in caz de rezultate serologice echivoce; Aceleasi teste calitative evidentiaza infectia cu virusul C precoce la 2 sapt de la contact preinfectant ; Certifica vindecarea prin faptul ca sunt mult mai sensibile decat testele cantitative

Teste cantitative de biologie moleculara- masoara incarcatura virala , viremia si monitorizeaza terapia

→evidentierea Ag de miez prin ELISA→testul se pozitiveaza la 2 zile dupaPCR si este util in centrele de transfuzii ptr a decela persoanele aflate in perioada anterioara seroconversiei sau a cazurilor rare la care Ac anti VHC apar tardiv sau niciodata .

Dg. IndirectSe poate realize prin :

- Teste de tip screening ( ELISA de generatia a 3 a)-se folosesc Ag structurale si nestructurale adsorbite pe faza solida .

-sunt mai sensibile si mai specifice decat testele de generatia a 2 a . - Teste de confirmare – testul RIBA ~seamana cu WESTERN BLOT , doar ca Ag sunt asezate la distante egalepe banda de nitroceluloza ;~poate specifica tipurile de Ac;~este util in predictii evolutive si de raspuns la tratament.

Interpretarea unui rezultat RIBA- pozitiv = daca sunt prezente cel putin 2 categorii de Ac ;- negativ = daca nu este prezenta nicio banda (Ac absenti);- indeterminabil = daca este o singura banda de Ac .

ALGORITM : NegativELISA→ser pacient reactiv→Teste de confirmare→RIBA ↑→Indeterminabil→ELISA ↓ →RT-PCR Pozitiv

4