Centrul de Cercetareîn Gastroenterologie

şi Hepatologie

UMF Craiova

INTRODUCERE

UniversitateadeMedicinăşiFarmaciedinCraiovareprezintăsingurainstituţiedeînvăţământsuperiormedicaldinregiuneadesud-vestaRomâniei,deservindprioritarpeste2,5milioanedelocuitori.

Din2007,UMFCraiovaaconstituitoechipămultidisciplinarăcareaaplicatlaîncepu-tulanului2008laAutoritateaNaţionalapentruCercetareŞtiinţificăpentruaobţineasistenţăpublicăfinanciarănerambursabilă(cuunproiectevaluatșicâștigatprincompetiţienaţionalăîncadrulaxeiPOSCCE-A2-0.2.2.1-2007-1+Capacităţi-I-2007-2,darcuevaluatoriexclusivdinstrăinătate).DupăcâştigareaproiectuluişisemnareacontractuluicuANCS,UMFCraiovaademaratînseptembrie2008unproiectdecercetaredeexcelenţărevoluţionarnudoarpen-truregiuneadesud-vestaRomâniei,cipentruîntreagaţară:“TARGET–CentrudeCercetareşiTratamentînGastroenterologieBazatpeMetodeImagisticeşiStudiiMoleculare”.Valoareatotalăainvestiţieipentruproiectulpropusafostde70.331,13MiiRON,inclusivTVA,şiacuprinscosturipentruconstrucţiauneiclădirinoi,amenajareaunorspaţiiexistenteşipentruîmbunătăţireainfrastructuriidecercetare-dezvoltareprindotareacuechipamentedeultimăgeneraţie.

Prinscopulsau,proiectulTARGETşi-apropussăcreezeuncentrudeexcelenţăregionalîndomeniuldiagnosticăriiprecoceşitratamentuluiînpatologiadigestivămalignă.PentruatingereascopuluisevacreaunCentrudeCercetaredeExcelenţăsuprapuspesteinfra-structuradejaexistentăaCentruluideCercetareînGastroenterologieșiHepatologie,alcătuitdintreimodulecarevorfavorizaelucidareamecanismelordecontrolmolecularalcreşteriişidiferenţieriicelularelanivelulorganelordigestive,prinintegrareadiagnosticuluiimagisticprecoce(ModuldeImagisticăDigestivă),atehnicilorcomplexedepatologieşiimunologie(ModuldePatologieşiImunologie),respectivamecanismelorgenomice(ModuldeBiologieMoleculară).

RomâniaesteprintrepuţineleţăridinCentrulşiEstulEuropeiîncareNUsuntinstalatesiNUfuncţioneazăînsistemulpublicechipamenteintegratePET-CTsiMRI-3T,pacienţiidinţaranoastrăfiindprivaţideaportulbeneficaldetecţieiprecoceadiferitelorafecţiunidiges-tiveînfazadedebutcândtratamentulinstituitesteeficient.ÎncadrulproiectuluivorfiastfelintroduseînpremierăînRomâniatehniciimagisticecomplexe,detipultomografieicuemisiedepozitroniîncombinaţiecutomografiacomputerizată(PET-CT),respectivarezonanţeimag-netice(MRI),colonoscopieivirtualeMRşicolangio-pancreatografieiprinrezonanţămagnetică(MRCP).

Combinaţiadintremetodeleendoscopice“state-of-the-art”,respectivPET-CTsiMRI-3TvafiunicatinRomania,permiţândrealizareadecercetăriinterdisciplinareîndo-meniulcancerelordigestive.SistemulPET-CT,folositcaun“standarddeaur”deoncologie

gastroenterologicăvafiunicatînsistemulpublicdinRomâniaRomânia.Maimultepro-ceduriendoscopice(autofluorescenţă,endomicroscopieconfocalălaser,ecoendoscopiecusubstanţădecontrast,precumșiprocedurihibride,etc.)aufostsauvorfideasemeneaefectuateînpremierăînRomânia,peperioadaderulăriiproiectului(3ani)sauînperioadapost-implementare(5ani).

Dintreindicatoriiproiectuluiaufostdejaîndepliniţiceilegaţiderealizareauneiconstrucţiinoișideamenajareaspaţiilorînconstrucţiiexistente,princreareaa8laboratoarenoișiamenajareaa25delaboratoareșispaţiisuportexistente,respectivachiziţionareade10echipamentedecercetare-dezvoltaredepeste100.000EUR,dintotalulde64echipamenteachiziţionate,inclusivIT.Temeledecercetareabordatepeperioadadeimplementareaproiectuluiaucondusdejalacâștigareadenoiproiecteîncompetiţiileinternaţionalesaunaţionalecuevaluareinternaţională,lansatedeCon-siliulNaţionalalCercetăriiȘtiinţificeînperioadadefinalizareaproiectului(2011-2012),incluzând2proiecteeuropeneFP7(înparteneriat),1proiectCapacităţi(EuropeanRe-searchCouncil–like,detipGrantSuport),2proiecteIdei(dincareunulcudirectordinstrăinătate)șirespectiv2proiecteParteneriate(cașiconducătordeproiect).ProiectulTARGETvapermitecreareaa28delocuridemuncănoi,iar15locuridemuncăexistentevorfimenţinute.AufostdejaatrașiînproiectelecâștigateîncadrulCentruluideCer-cetareînGastroenterologieșiHepatologie,2cercetătoridinstrăinătate,delaHarvardUniversityșirespectivUniversityofNewMexico,USA.

Nuînultimulrând,activităţiledincadrulcentruluidecercetarevorpermiteşiefectuareadeserviciimedicaledeînaltăperformanţăşielaborareadeprogramecuacceslargpentrucategoriidefavorizatealepopulaţiei:bătrâni,şomeri,etc.

6UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

COMPARTIMENT GASTROENTEROLOGIE• Laborator de Autofluorescenta Endoscopica (AFI)• Laborator de Endoscopie Ultrasonografica (EUS)• Laborator de Endomicroscopie Confocala Laser (CLE)• Laborator de Tomografie cu Coerenţă Optică (OCT)• Laborator de Cromoendoscopie cu Magnificatie (MCE)• Laborator de Bronhoscopie şi Ecobronhoscopie• Laboratorul de Enteroscopie cu Videocapsulă şi Balon (VCE)

COMPARTIMENT HEPATOLOGIE• Laborator de Elastografie Ultrasonografică (RSE)• Laborator de Sonografie Virtuală în Timp-Real (RVS)• Laborator de Ecografie cu Contrast (CEUS)

COMPARTIMENT PATOLOGIE MOLECULARĂ • Laborator de Anatomie Patologică• Laborator de Imunofluorescenţă şi Analiză Computerizatăa Imaginii• Laborator de Microdisecţie laser, citologie şi imunocitochimie• Laborator de Genomică• Laborator de Culturi celulare şi Citogenetică

COMPARTIMENT IMAGISTICĂ• Laborator de Imagistică prin RezonanţăMagnetică (MRI)• Laborator de Imagistică de fuziune (PET-CT)• Laborator de Radiologie Digitală şi Endoscopie intervenţională (DRX)

CUPRINS

88

101214151618

20202122

232324

25

2628

3030

3233

7UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

Scopul Centrului de Cercetare în Gas-troenterologie şi Hepatologie este de aameliora managementul bolilor digestive(în special al cancerelor digestive) princercetări interdisciplinare, diagnostic pre-coce şi tratament individualizat. CentruldeCercetareînGastroenterologieşiHepa-tologieesterecunoscutlanivelnaţionalşiinternaţional pentru excelenţă ştiinţificăşi publicarea a multiple studii, concen-trate în special asupra canceruluidigestiv.

CentruldeCercetareînGastroenterologieşiHepatologieafostînfiinţatîn2005,fiindacreditatdecătreCONSILIULNAŢIONALALCERCETĂRIIŞTIINŢIFICEDINÎNVĂŢĂMÂNTULSUPERIOR(CNCSIS).CentrulesteconstituitîncadrulUniversităţiideMedicinăşiFarmacieCraiova,România,avândmenireadeaconglomeraşistimulacercetăriledincadrulinstituţiei,cuscopulfinaldeaîmbunătăţicomponentadecercetare,dezvoltareşiinovare,darşideaoferiserviciidiagnosticedeînaltăperformanţă.

ORGANIZAREA COMPARTIMENTELOR CENTRULUI DE CERCETARE ÎN GASTROENTEROLOGIE ŞI HEPATOLOGIE

CompartimentGastroenterologie

CompartimentHepatologie

CompartimentPatologieMoleculară

CompartimentImagistică

8UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

LaCentruldeCercetareînGastroen-terologieşiHepatologiedinCraiovaafostinstalatîn2008(înpremierăînRomânia)unsistemcomplexdeautofluorescenţăendoscopică.Autofluorescenţaendoscopicăafostintrodusărecentcaometodădescreeningpentruleziunileneoplazicealetractuluidigestiv(displazieseveră,canceresofagianşigastricprecoce,cancercolorectalprecoceetc.).Prin-cipiulautofluorescenţeiestebazatpeinteracţiuneadintreluminacuoanumitălungimedeundăşifluoroforiidinţesuturi.Detecţialeziunilorprinautofluorescenţădepindedeschimbărileînconcentraţiadiferiţilorfluorofori,modificărilearhitecturaletisularesauam-bele,incluzândalterareagrosimiimucoaseisaucirculaţieisangvinecarepotafectaintensitateafluorescenţei. Laboratorul oferă în mod curent proceduri de diagnostic de înaltă performanţă, cum ar fi:

►Examinăriendoscopiceeso-gastro-du-odenaletrimodale:examinareînluminăalbă cu magnificaţie, autofluorescenţăendoscopică,mod Narrow Band Imaging. ► Biopsii prelevate endoscopic din lezi-unileeso-gastro-duodenaleşicolorectale ►Proceduriterapeuticecomplexe:polipec-tomiişirezecţiiendoscopicedemucoasă. ► Ligaturi de varice esofagiene şihemostază endoscopică în hemoragiiledigestive.

LABORATORUL DE AUTOFLUORESCENŢĂ ENDOSCOPICĂ (AFI)

COMPARTIMENT GASTROENTEROLOGIE

9UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

Toateacesteprocedurisuntcompletatecuanalizabiopsiilorprinexamenecomplexehistologiceşiimunohistochimice.

MediciişicercetătoriiCentruluideCercetareînGastroenterologieşiHepatologiedinCraiovaauladispoziţieunsisteminstalatînpremierăînRomânia:

►LiniedeendoscopieOlympusLuceraîncorporeazăfuncţiimultiplecarefolosescexaminăricuspectrudeluminăvariabil,înplusfaţădeexaminărileconvenţionaleînluminăalbăşimoddeînaltărezoluţie(HDTV).Celetreimodalităţideexaminaresuntendoscopiaculuminăalbăşimagnificaţie(zoom),modulNarrowBandImaging(NBI)şiAutofluorescenţăEndoscopică.AvantajulmajoralmoduluiNBIestereprezen-tatdevizualizareamaibunăapattern-uluicapilarşitexturiimucoasei(pitpattern).Înplus,utilizareaautofluorescenţeiendoscopicepermitevizualizareaînculoridiferitealeziunilorprecoce(displazieseveră,cancergastricprecoceetc.),comparativcumu-coasanormală.

►Sistemdecoagulareînplasmaargon(APC)tipErbeAPC2carepermitecoagu-larearapidăşisigurăaunorsuprafeţemari,cupenetrabilitatemicăşiimplicitriscdeperforaţiemic,obţinutprintr-oprocedurănon-contactcuaplicareaxială,radialăşilaterală.

ActivitateaLaboratoruluideEndoscopieUltrasonografică(EUS)aînceputîn2001,uti-lizândunsistemdigitallinearecoendoscopicdeînaltărezoluţie.ÎncadrulCentruluideCer-cetareînGastroenterologieşiHepatologieaufostînregistratemultiplepremiere,înprivinţadiagnosticuluişiatratamentelorfolosite.Astfel,aufostutilizate,de-alungulanilor:elastografiaEUS,endoscopiaultrasonograficăcusubstanţădecontrastdegeneraţiaaII-a,drenajulghidatecoendoscopicalpseudochis-turilorpancreatice,neurolizadeplexceliacghidatăecoendoscopicetc.MultedintrecazurileilustrativeşiprocedurileefectuatesuntdescriseînAtla-suldeEcoendoscopieLiniară(www.EUSAtlas.ro),găzduitdeweb-servereleUniversităţiideMedicinăşiFarmaciedinCraiova.

Laboratorul oferă în mod curent proceduri de diagnostic de înaltă performanţă, cum ar fi:

►Examinăricuminiprobeecoendoscopicedeînaltărezoluţieşiînaltăfrecvenţă

►Examinărideecoendoscopieliniară,inclusivînmodDopplercolor,examinăricusubstanţădecontrastsauelastografieecoendoscopică

►Puncţiefinăaspirativăsaupuncţiebiopsiecuacgrosghidateecoendoscopicînformaţiunilesuspecte(formaţiunitumo-rale,ganglionietc.)

►Proceduriterapeuticeghidateecoendo-scopic(drenajdepseudochisturi,neurolizădeplexceliacetc.)

Toateacesteprocedurisuntcompletatecuanalizaimediatăaeşantioanelorpre-levateprincitologieşiimunocitochimie,înprezenţaunuicitopatolog.

LABORATORUL DE ENDOSCOPIE ULTRASONOGRAFICĂ (EUS)

10UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

MediciişicercetătoriiCentruluideCercetareînGastroenterologieşiHepatologiedinCraiovaauladispoziţiesistemedeultimăgeneraţie,extremdeperformanteşifiabile: ►SistemeledeultrasonografiHitachiEUB8500şiHitachiPreirusHiVision,utili-zatecusuccesindomeniiprecummedicinainternă,oncologie,gastroenterologieşihepatologie,inclusivprinexaminări3D,DopplercolorşipowerDoppler,respectivdetipulelastografiei.SonoElastografiapermiteevaluareadurităţii(compresibilităţii)ţesuturilorfiindrecentutilizatăpentrudiagnosticuldiferenţialalformaţiunilorbe-nigneşimaligne(tumoripancreatice,ganglionietc.) ►EcografulHitachiEUB8500estedotatcuunmodulcombinatdeecografie-to-mografiecomputerizată/rezonanţămagnetică(Real-timeVirtualSonography),carepermiteexaminareaîntimprealaformaţiunilortumoralehepaticepentruefectuareaîncondiţiidesiguranţăaprocedurilorintervenţionale.Ambelesistemedeultrasono-grafiepermit,deasemenea,examinareacusubstanţădecontrastdegeneraţiaaII-a,cuobţinereaunorrezultatecomparabileexaminărilorcomputertomografice. ►Larândulsău,sistemulHitachiestecuplatlavideoendoscopullinearPentaxEG3870UTKcarefurnizeazăuncâmplărgitdevizualizare,cuocalitateaimaginiimultîmbunătăţită,permiţândşiefectuareapuncţiilorghidateecoendoscopic,respectivamanevrelorterapeutice. ►ProcesoruldeminiprobeFujinonpermitevizualizareastructurilormaimicide1-2cm(avândrolimportantîndepistareaprecoceacanceruluiesofagianşigastric,re-spectivînexaminăriintraductalelanivelulsistemuluibiliarşipancreatic).

11UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

Endomicroscopiaconfocalălaseresteotehnicărecentintrodusăcarepermiteexaminarealanivelcelularşisubcelularastructurilormucoaseitubuluidigestivîntimpulexaminăriiendoscopice.Principiulendomicroscopieiconfocalelaserestebazatpeintegrareaunuimicroscopconfocallaserînextremitateadistalăaunuiendoscopconvenţional.

Întimpulexaminăriiendomicroscopicesefoloseşteorazălasercaregenereazăoundadeexcitaţiede488nm,permiţândobţinereadesecţiuniopticetisularede7μmcuorezoluţielateralăde0,7μmşiopenetraţieîntre0si250μm.Astfel,sepotobţineimaginihistologiceinvivocuposibilitateaaprecieriidetaliilorcelulare.Agenţiidecontrastcelmaidesutilizaţisuntreprezentaţidefluoresceinasodicăcuutilizareintravenoasăşiacriflavinacareseaplicătopiclanivelulsuprafeţeiexami-nate.

Impactulclinicmajoresteoferitdeposibilitateadiagnosticuluiinvivoalleziuni-lormaligneşi,totodată,deposibilitateaprelevăriidebiopsiiţintitedinzonelecelemaisemnificativepentrudiagnosticpentruoexaminareanatomopatologicăulterioară.

LABORATORUL DE ENDOMICROSCOPIE CONFOCALĂ LASER (CLE)

12UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

Endomicroscopiaconfocalălaserareaplicaţiiclinicemultiple:

►diagnosticulesofaguluiBarrett,leziunilorpremaligneşimaligneesofagiene

►diagnosticulinsitualH.Pylori,leziunilorpremaligneşimalignegastrice

►diagnosticuldiferenţialalpolipilorhiperplazicişiadenomatoşi

►supraveghereaendoscopicăacoliteiulcerativeşiboliiCrohn

►depistareaprecoceacanceruluicolorectal.

Studiilerecenteprivindaplicaţiileutilizăriianticorpilormarcaţicuagenţidecontrastauconturatunnoudomeniu:imunoendoscopia.Astfel,încurândvafiposibilstudiulinvivoalexpresieianumitormarkericuimpactprognosticlanivelulleziunilorde-pistateprinendomicroscopie[TNFaînbolileinflamatoriiintestinale,CD117(c-kit)capredictoralrăspunsuluilaimatiniblapacienţiicutumoristromalegastrointestinale,EGFRlapacienţiicucancercolorectalpentruaprecierearăspunsuluilatrata-mentulcucetuximabetc].

Endomicroscopiaconfocalălaservajuca,cusiguranţă,unroldinceîncemaimareîncadrulproceduriloren-doscopicedincentreledereferinţădinlumeprinmareleavantajpecareîloferă-undiagnosticimediatşidecertitudine.Tehnicaestedisponibilădin2008înCentruldeCercetareînGastro-enterologieşiHepatologiedinCraiova.

13UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

Tomografia Optică Coerentă(OCT) este o metodă imagisticăbazată pe interacţia radiaţiei op-ticeprovenitădelaosursăopticădecoerenţă redusă cu obiectul investi-gat,interacţierealizatăîntr-unmontajde tip interferenţial.Aparentsimilareunor măsurători ecografice, studiileOCT nu implică însă analiza directă (ca în cazul ecografiei) a intensitaţii sem-naluluiobţinutdupăreflexia(optică)peţesutulstudiat;metodaimplicăanalizafiguriideinterferenţăobţinuteînurmainteracţieiîntrefascicolulreflectatşiunfascicoldereferinţăprovenitdelaaceeașisursă.Aceastădiferenţăînabordaresedatoreazăfaptuluicăpropagareadirectăasemnaluluiopticestemultmairapidădecâtîncazulmecanic(ultrasunete).AvantajelemetodelorOCTincludorezoluţiedeordinulmicronilor,folosirearadiaţieioptice-neinvaziveprecumşiposibilitateadecuplăriirezoluţieiaxialedecealaterală.

AparaturafolosităînmasuratoridetipOCTestecompusăîngeneraldintr-osursăderadiaţieopticăparţialcoerentă,unmontajinterferenţialșiunsistemdedetecţie.Acestoraleesteadăugatunsistemsoftwaredeanaliză, interpretareșireprezentaresubformădeimaginiasemnalelorînregistrate.

Măsuratorile de tip OCT în domeniul medical sunt în faza de studii (cuexcepţiadomeniuluioftalmologic). Laboratorul încearcă stabilireaunei legăturiîntremăsurătoriledetipecoendoscopicșiceledetipOCTînscopuldezvoltăriiunortehnicihibridecaresăpermităomaibunăanalizăaleziunilordetiptumoraldintractulgastrointestinal.

Aparatul folosit înmăsurători esteTHORLABSOCS1300SSde tipSS-OCTșiasigurăefectuareademăsurătoridetipOCTșiDoppler-OCT(D-OCT)laolun-gime de undămedie de 1320nm cu o rezoluţie de 10μmoferind posibilitateaachiziţionăriideimagini2Dşi3Dîntimprealaleunorprobebiologiceînvivosauîn-situ.

LABORATOR DE TOMOGRAFIE CU COERENŢĂ OPTICĂ (OCT)

14UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

LABORATOR DE CROMOENDOSCOPIE CU MAGNIFICAŢIE (MCE)

Cromoendoscopiaclasicăimplicăutilizareatopicădecoloranţivitali(soluţieLugol,al-bastrudemetil,etc.)înscopulîmbunătăţiriiacurateţiidiagnosticeaexaminărilorendo-scopice.Folosităîmpreunăcuendoscopiacumagnificaţiepermitevizualizareadetaliatăamucoasei,îmbunătăţindastfeldiagnosticul

precocealleziunilorpremaligneşimalignedelanivelultractuluigastrointestinal. ÎnCentruldeCercetareînGastroenterologieşiHepatologiedinCraiovadispunemdeposibilitateafolosiriiendoscopieicumagnificaţiecombinatăcutehniciimagisticemodernecanarrowbandimagingşiI-scancarerealizeazăocromoendoscopieoptică,carenumainecesităfolosireacoloranţilorvitali. Narrowbandimaging(NBI),endoscopiaculuminăînbandăîngustă,esteotehnicăimagisticăcarepermitevizualizareapatternuluimucoasei(pit-pattern),precumşiavaselordinmucoasăşisubmucoasă,prinfolosireacaracteristicilorspectruluiluminos.PerformanţeleNBIsuntmultîmbunătăţiteatuncicândestecombinatăcuexaminareacumagnificaţie(ME-NBI),rezultatesimilareobţinându-seşicuexaminareaînmodI-scan.Aceastetehnicipermitanalizamorfologicăaepiteliuluimucoaseişiaarhitecturiisuperfi-cialeanormale(pit-pattern)dinleziunileneoplazice,însăceamaiimportantăcontribuţieestereprezentatădevizualizareaclarăareţeleivascularedinmucoasă,fiindutilăînspe-cialînevaluareaprocesuluideneoangiogenezăanormalădindisplaziadegradînaltşicancerulprecoce. Înpractică,folosireaexaminăriiînmodnarrowbandimagingcumagnificaţiesauI-scanesteindicatăînspeciallapacienţiicufactorideriscsaupentrusupravegherealeziunilorpreneoplazicedelanivelulesofagului,stomaculuişicolonului(esofagBarrett,gastrităatrofică,metaplazieintestinală,displazie,polipi,boliinflamatoriiintestinale).

15UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

CentruldeCercetareînGastroentero-logieşiHepatologieareindotareunvideobronhoscopflexibildeultimăgeneraţie(OlympusEVISEXERAIIBF-Q180)carepermiteexaminăridiagnosticevideobronhoscopice:

►vizualizareacuungradridicatdeprecizieşifidelitatecrescutăaarboreluibronşic,delatraheepânălabronşiiledecalibrumic;

►prelevareadebiopsiidemucoasăbronşică,biopsiitumoralesautransbronşicefărăriscurimajore;

►asociereacufuncţiaNBI(NarrowBandImaging),putându-seobservaastfelstruc-turilevascularedelanivelulsubmucoaseiarboreluibronşic;

►asociereauneigamelargideinstrumentarlanivelulcanaluluistandardde2.0mmdiametrupentruefectuareaprocedurilordeterapieendobronşică,înasociereşicuutilizareaunuisistemdecoagulareînplasmaargon(ERBE).

Estedeasemeneadisponibil,înpremierăînRomânia,unsistemcomplexdeeco-bronhoscopie(bronhoscopieultrasonografică),ceamainouămetodaminiminvazivădediagnosticareşistadializareatumorilormediastinale.Astfel,ecobronhoscopulOlympusEVISEXERABFUC160Festeunaparatminiaturizatcareareurmătoarelecaracteristici:

►endoscopulde6mmdiametruprezintălacapătuldistalosondăultrasonograficăliniarăcareoferăoimaginecontinuăînmodBşiposibilităţiDopplercolorşipowerDopplerînvedereaidentificăriistructurilorvasculare

►proximaldesondaultrasonograficăşila30°deaxullungalbronhoscopuluiseaflăcameravideoşicanaluldebiopsieprincaresepoateintroduceaculdepuncţiefinăaspirativă

►unbalondinlatexesteplasatpestesondaultrasonografică,încareseintroduceserfiziologic,pentruarealizaointerfaţăîntresondăşipereteletraheal.

LABORATORUL DE BRONHOSCOPIE ŞI ECOBRONHOSCOPIE (EBUS)

16UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

SpecialiştiiCentruluideCercetareînGastroenterologieşiHepatologiedinCraiovapotrealizaastfel,investigaţiiecobronhoscopicepentru:

►diagnosticareainvazieitumoraleînbronhiilecentraleşiperiferice

►evaluareastaţiilorganglionare paratraheale (staţiile2şi4),subcarinale (staţia7),hilareşiintrapulmonare(staţia10şi11)

Maimult,metodapoateficombinatăcuecoendoscopia(endoscopiaultrasonografică),fiindaccesibileastfeltumorileşistaţiileganglionareculocalizareînmediastinulsuperiorşiinferior,cuexcepţialocalizăriloranterioaredetrahee:

►lateraldetrahee(staţia2şi4),fereastraaorto-pulmonară(staţia5),paraaortic(staţia6),subcarinal(staţiile7)şiparaesofagian(staţia8şi9)

Combinaţiacelordouămetode(EUS+EBUS)permiterealizareaunei“mediastino-scopii”complete.Efectuareaecobronhoscopieicupuncţiefinăaspirativăîncombinaţiecuecoendoscopiacupuncţiefinăaspirativădeterminăcreştereaacurateţeievaluăriitu-morilormediastinale,cuscădereaproporţieiderezultatefalsnegative.Consecinţadirectăconstăînscădereanumăruluideinvestigaţiiinvaziveşiimplicitscădereamorbidităţiişimortalităţiideterminatedeintervenţiilechirurgicaleinutile.

17UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

Enteroscopiaşivideocapsulaendoscopicăsuntdouăproceduridediagnosticextremdeutileînevaluareapatologieiintestinuluisubţire.Explorareaintestinuluisubţireafost,pânălaapariţiasistemelordeenteroscopieşia videocapsulei,foartegreuaccesibilăclinicienilor,diagnosticulfiindstabilitadeseaprinprocedeechirurgicale.

Sistemul de videocapsulă endoscopică

Explorareacuvideocapsulăesteextremdeuşordeefectuatpentrupacient,fiindometodăneinvazivă.Practic,dispozitivulareformauneicapsulededimen-siunimici,deunicăfolosinţă,careesteînghiţităşicarepreiaimaginilafiecare2secundedelanivelultubuluidigestivpeoduratădeaproximativ8ore.Imaginilesuntpreluatedeuncomputerşisuntulteriorexaminatedeunclinician,putându-sestabiliundiagnosticcuacurateţeridicată,evitându-seastfel,efectuareadeintervenţiichirurgicaleînscopdiagnostic.Deoareceareuneleavantajefaţădeexaminareaendoscopicăaintestinuluisubţire(nunecesităsedaresauinsuflarede

aer,estenedureroasăşineinvazivăetc.)esteuşoracceptatădepacienţi.Esteînprezentmetodadeprimăintenţieînevaluareaînscopdiagnosticapacienţilorcupatolo-gieaintestinuluisubţire.

Videocapsulaendoscopicăareşiunelecontraindicaţii:stenozeleintestinale,intervenţiichirurgi-caleanterioaremajore,tulburăridedeglutiţie,pacemakercardiacsaualtdispozitivelectromedicalimplantat,fistuleledigestiveetc.

LABORATORUL DE ENTEROSCOPIE

18UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

Deşivideocapsulaendoscopicăesteometodăexcepţională,eaareînsăşiinconve-nientulimposibilităţiiprelevăriidebiopsii,darşialefectuăriiunormanevreterapeutice.Prelevareadeprobeesteabsolutnecesarăstabiliriiunuidiagnostichistologiccaresăcon-firmesuspiciuneauneiboli.Astfel,s-adezvoltatoaltăexploraredeosebitdeutilăîndiag-nosticulşitratamentulafecţiunilorintestinuluisubţire:enteroscopiacubalon.SistemuldevideocapsulădisponibilînCentruldeCercetareînGastroenterologieşiHepatologiesenumeşteEndoCapsuleşiestefurnizatdefirmaOlympus.Videocapsulaare11/26mm,preia2imaginipesecundăşiduratadeviaţăabaterieiestede8ore.

Sistemul de enteroscopie

Enteroscopia cu balon a adus beneficii majore în diagnosticul şi tratamentulafecţiunilorintestinuluisubţire,fiindînprezentdisponibilăînmarilecentredegastroen-terologiedinlume.ÎnRomânia,tehnicaestelaînceputdedrum,CentruldeCercetareînGastroenterologieşiHepatologiedinCraiovafiindundeschizătordedrumuriîndomeniu,odatăcuachiziţionareasistemuluideenteroscopiecubalonOlympusînanul2008.

Enteroscopiacubalonesteotehnicăendoscopicănouăcarepermiteexaminareaparţialăsautotalăaintestinuluisubţire.Enteroscopulseintroduceprincavitateabucalăşiavanseazăprinesofag,stomac,duodenşiporţiuniledistalealeintestinuluisubţire.Manevrapoatefidureroasăşipresupuneinsuflareadeaceeaseefectuezăîngeneralcusedareşianal-gezie,subsupraveghereaunuimedicanestezist.Avantajulsăufaţădecapsulaendoscopicăestecăpermiteefectuareademanevreterapeuticeşiprelevaredebiopsii,evitându-seastfelintervenţiilechirurgicaleinutile.

RecentafostintroduslaCraiovaşisistemuldeenteroscopiespirală,carepermiteevaluareacompletăaintestinuluisubţire.

19UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

Elastografiaultrasonograficăafostrecentdezvoltatăpentruaplicaţiiclinice,permiţândanalizaîntimprealacomportamentuluidinamicalţesuturilor.Metodadezvăluieproprietăţilefizicealestructurilorinterne,caracterizânddiferenţadeduritateîntreţesuturilepato-logiceşinormale.Acesteinformaţiipotfiobţinuteîntimpulscanăriiecograficeîntimpreal,rezultatelefiindrelevateprinsuprapunereacolorpesteimagineaalb-negruaecografieiconvenţionale.

AplicaţiiledeultimăorăaleelastografieiultrasonograficedisponibileînCentruldeCercetareînGastroenterologieşiHepatologieCraiovasunt:

►apreciereastadiuluifibrozeihepaticelapacienţiicubolihepaticecronice

►diagnosticulşicaracterizareaformaţiunilorfocalelocalizatelanivelulficatului.

LABORATOR DE ELASTOGRAFIE ULTRASONOGRAFICĂ (RSE)

20UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

COMPARTIMENT HEPATOLOGIE

Modulul“Real-timeVirtualSonogra-phy”(RVS)permiteafişareasimultană,întimp-real,aimaginiiecografice,împreunăcuimagineacorespondentădecomputertomografie(CT)saurezonanţămagnetică(RM),reconstruitedintr-unsetmultiplanarvirtual3DobţinutpebazaunuivolumstocatanteriorînformatDICOM.Folosindunsensordepoziţiemagnetică,plasatpesondaecografică,modululoferăastfelafişareasimultanăasecţiuniiCTsauRMcarecorespundeimaginiiultrasonograficereale.

ModululRVSoferăunghidajimagisticexcepţionalpentruprocedurileintervenţionale,înspecialpentruefectuareaablaţieicuradiofrecvenţă.Modu-luloferăoafişaremaibunăaanatomieiultrasonografice,permiţândplasareaexactăaacelorşimonitorizareaprecisăatratamentului.Compatibilitateacumoduldeexaminarecuindexmecanicscăzut,cusubstanţădecontrastdegeneraţiaaII-apermiteoexaminaremaibunăamorfologieişiavascularizaţieileziunilorfocalehepatice,înspecialcelecaresuntmaigreuvizibileîntimpulecografieiconvenţionaleînmodB.

Beneficiilemodululuideecografievirtualăîntimprealinclud,astfel,creştereaîncrederiidiagnostice,comparaţiadirectăaleziunilorfolosinddiferitemodalităţiimagisticeşimonitorizareaprecisăatratamentelorintervenţionale,cuexpuneremaimicălaradiaţii.

MODULUL DE SONOGRAFIE VIRTUALĂ ÎN TIMP REAL

21UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

LABORATOR DE ECOGRAFIE CU CONTRAST (CEUS)

CentruldeCercetareînGastroente-rologieşiHepatologiedinCraiovaesteunuldintreprimelecentredinRomâniaundeseefectueazăecografiecusubstanţădecontrast.Metodanecesităunaparat

ecograficfoarteperformantșiconstăînadministrareauneisubstanţedecontrastceajungelanivelulvaselorsangvineșiîmbunătăţeștemultdiagnosticulobţinutprinecografiaclasică.Substanţadecontrastecograficesteunamestecdebuledegazînglobateîntr-ocapsulăfosfolipidicăcareseeliminăprinrespiraţie,deaceeametodasepoaterealizașilapacienţiicuinsuficienţăhepaticășirenală.Substanţadecontrastecograficdeterminămaipuţinereacţiialergice,deoarece,spredeosebiredecontrastulfolositlatomografiacomputerizată,nucontineiod.

Indicaţiile ecografiei cu contrastEcografiacucontrastişigăseșteaplicabilitateînpato-logiapancreatică,hepatică,splenică,desân,tiroidă,cordsauprostată.Metodaestefolosităcurezultatefoartebuneîndiagnosticultumorilorhepatice.Prinecografiecucontrastsepoatefacediferenţiereaîntretumorilebenigneșicelemaligne.Deasemenea,pentrupacienţiicupatologieoncologică,metodaestefolosităpentruurmărireaeficienţeitrata-mentuluișipentrudepistareametastazelorhepatice.DeoarecenufoloseşterazeX,metodaesteidealăpentrucopii,cuaplicaţieînspecialîndiagnosticulrefluxuluivezico-ureteralsaudepistareacomplicaţiilortraumatice.Totdatoritălipseiiradierii,ecografiacucontrastpoatefifolosităpentruurmărireaperiodicăapacienţilorcupatologieoncologică,învedereadepistăriimetastazelorhepatice.

Contraindicaţiile ecografiei cu contrastEcografiacucontrastnuseefectueazălapacienţiicuinsuficienţărespiratorieseveră,lapacienţiicuinfarctmiocardicrecent,lagravidesaufemeicarealăptează.

Principalele avantaje ale ecografiei cu contrast: ►Rapidă,seefectueazăimediatdupăecografiastandard ►Neiradiantă,repetabilă ►Maiieftinășicumaipuţinereacţiialergicecomparativcutomografiașirezonanţamagnetică ►Poatefiefectuatălapacienţiicucontraindicaţiepen-trutomografiesaurezonanţămagnetică:pacienţicuinsuficienţărenală,hepaticăsaucuimplanturimetalice ►Performanţeasemănătoaretomografieisaurezonanţeimagnetice.22

UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

LABORATOR DE ANATOMIE PATOLOGICĂ

LaboratoruldeHistopatologiealDeparta-mentuluideAnatomiePatologicăalUMFdinCraiova,parteneralCentruluideCercetareînGastroenterologieşiHepatologie,estedotatcutotechipamentulşiconsumabilelenecesarepentrufixarea,procesareaşicolorareablocuri-lordeţesutînvedereadiagnosticuluihistopatologic.Deasemenea,oferăunrealsuportcercetărilorîndomeniuprindetalierealanivelcelularamodificărilorapăruteîncursuldi-verselorbolişiaexperimentelorştiinţificeefectuate.Principaleleetapealeacestuiprocessuntsusţinutedebazamaterialăincluzândmijloacelefixe,dupăcumurmează:

►Masadedisecţiededicatăcusursadeapăşihotă;

►Băidefixareînformalinătamponată4%;

►Băidedeshidratareşiclarificare(alcoolşixilen);

►Termostatdeparafinareşistaţiedeturnareablocurilordeparafină;

►MicrotomrotativMicrom;MicrotomrotativcompletautomatizatLeicaRM2255;

►Băişicuvededeparafinare,rehidratareşicolorare;

►BaiedeapăMemmertcuplatformădeagitare,etuvăMemmert,shakerHeidolphTitramax1000,balanţăanaliticăelectronică;pH-metre;pipeteşimicropipeteauto¬mate;agitatormagnetic,aparatfrigorificpentrupăstrarepieseşireactivi;

►MicroscoapeNikonECLIPSEE200,kituridecolorarehistochimică:

● Generalepentruţesuturileconjunctive:hematoxilină-eozină,tricromice(Mas-son,Goldner-Szekelly),policrome(Azan),pentrumastocite(albastrudetoluidină),pentruami¬loid(roşudeCongo),pentrudepoziteledefier(AlbastrudePrussia)

●Specificepentrumucopolizaharide:mucicarmin,PAS,albastruAlcian

●Specificepentrulipide(SudanIII,SudanIV,Acidosmic);

●Altecoloraţii:impregnaţieargentică,Cresylviolet,Luxolfastblue,May-Grun-wald-Giemsa.

COMPARTIMENT PATOLOGIE ŞI GENETICĂ MOLECULARĂ

23UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

CentrulpentruStudiideMorfologieMicroscopicăşiImunologiedinCraiova,parteneralCentruluideCercetareînGas-troenterologieşiHepatologie,estedotatcutotechipamentulşiconsumabilelenecesarerealizăriiunorimunomarcărifluorescente,precumşideunsistemperformantdemi-

croscopieșianalizăimagistică.Detecţiaimunofluorescentăaunoranticorpiprimarineconjugaţisaubiotinilaţisepoatefacecuanticorpisecundarietichetaţidirectcufluoro-foridinseriaAlexaFluor(Invitrogen),streptavidinefluoresceinate(Invitrogen),sautiramidafluoresceinată(PerkinElmer),înfuncţiedegraduldeamplificarenecesarăasemnaluluipentruodetecţieoptimă. Laboratoruldeanalizăimagisticăasistatădecalculatorsebazeazăpe: ► un microscop Nikon Eclipse 55iprevăzutcuobiectiveplan-acromate,cameradigitalăcolorcurăcirePeltierCCDDS-Fi1,5Mp(Nikon)şisoftdeanalizăimagisticăNikonNISEle-mentsBR; ► un microscop de cercetare Nikon 90i dotatcuobiectiveplan-fluor;cameradigitalăcurăcireRoleraXR(Qimaging,Canada),cuburidefiltrepentrufluorescenţă,şisoftdeanalizăimagistică,deconvoluţieşireconstrucţie3DImageProPlusAMS7(MediaCybernetics,USA).Majoritateafuncţiilormicroscopului90isuntacţionatedeser-vomecanismecomandatedeunmodulalpachetuluiIPPAMS,astfelîncâtachiziţiadeimaginisefaceautomatizatpefiecarecanalînparte,cusalvareaînfinalaimaginilorcompozite.Stepper-ulpiezoelectriccareasigurămişcareapreparatuluipeaxaZcuunpasdeminimum0,1μmpermitepreluareadeimaginiînplanurioptice(adâncimi)diferitealepreparatului. ► pachetul Image ProPlus AMS 7,careesteunuldintrecelemaiavansatesofturideanalizăimagisticădisponi-bilelaoraactuală,conţinemodulededicatepentrumăsurătoribidimen-sionale,celmaiperformantalgoritmdedeconvoluţieexistent(implemen-tatînmodululSharpStack),şiinstru-mentededicatedereconstrucţie3Dşimăsuratorivolumetrice(3DConstruc-tor).

LABORATOR DE IMUNOFLUORESCENŢĂ ŞI ANALIZĂ COMPUTERIZATĂ A IMAGINII

24UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

LABORATOR DE MICRODISECŢIE LASER, CITOLOGIE ŞI IMUNOCITOCHIMIE

Încadrulexaminărilordeecoendoscopie,sepotobţineprinpuncţiefinăaspirativăprobedinleziunimici(<10mm)situateîndiferitesegmentealeaparatuluidigestivdarşidelaniveluladenopatiilorregionale. Laboratoruldispunedeunsistemdemicrodisecţielaserşioliniedecitologieînmonostrat.Astfel,produsulobţinutprinpunctieaspirativăpoatefiprelucratînmaimultemoduri: ►Prinetalareadirectpelamadesticlaobţinându-sefrotiuri; ►Prinprelucrareînmediulichid–încadrulCCGHexistăunsistemsemiautomatdepre-lucrareînmediulichid,intitulatCYTOSCREEN.MetodaCYTOSCREENarelabazăpatruetapeprincipaleşianume:prelevareaprobeiînmediullichid,citireaautomatăadensităţiicelulareaprobeicuajutorulunuinefelometru,depunereacelulelorînmonostratpelamadesticlă,citireaşiinterpretareafrotiurilor,cuposibilitateaexaminăriidepreparatecvasi-identiceobţinuteulteriordinacelaşiprodusdeprelevare(screeningmorfologic)sauaefectuăriidetestecomplementare.Nefelometrulpermiteevaluareaautomatăcuajutorullaseruluiamaterialuluitisulardeexaminatşirecoltareaţintitădematerialtisularpentrutehniciledepatologiemoleculară. ►Prinincluderelaparafinacuobţinereablocurilorcelulare. Deasemenea,încadrullaoboratoruluiesteposibilăefectuareaamultiplecoloraţiiimunocitochimicecarecrescacurateţeadiagnostică.

25UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

LABORATOR DE GENOMICĂ

DepartamentuldeGeneticăMolecularădincadrulCentruluideCer-cetareînGastroenterologieşiHepatolo-gie(CCGH)oferăstudentilor,medicilorrezidenţisidoctoranzilorposibilitateainstruiriilauninaltnivelacademic.Preocupareapermanentăamembrilordepartamentuluiestedeagăsi,prinintermediulcercetărilorvizândnivelulmolecular,rezolvareaunorpro-blemecucareseconfruntămedicinaactuală.Deasemenea,pelângăofertaeducaţionalăşiimplicareaîncercetare,DepartamentuldeGeneticăMoleculară,prinlaboratoarelesale,efectueazăogamăvariatădeinvestigaţiiasupraacizilornucleici.

ColaborareapermanentăcuDepartamentuldeGastroenterologiedincadrulCCGHşiprinintermediulacestuiacualte5departamentecuaceeaşispecialitates-aconcretizatprinacceptareasprefinanţareapeste10proiectedecercetareaxatepeevaluareapatolo-gieimalignedinsferadigestivă.PelângăachiziţionareaunorsistememodernedeanalizăaacizilornucleiciacesteproiecteaupermisatâtspecializareamembrilordepartamentuluiîncentredecercetareimportanteînEuropacâtşidemarareaunuiampluprocesderecol-taredeprobebiologiceînvedereaconstituiriiuneibăncideADNsiARN.

Echipamente utilizate:

► Sistem automat de secvențiere Beckman Coulter CEQ 8000

Sistemulautomatdesecvenţieredetecteazăcuofotodiodălungimeadeundăindusăde2diodelaserprin4filtre.Sistemuldeoperareconţinefuncţii multiple pentru analizaADN şi pentru simplificarea ana-lizeişiinterpretăriidatelor.Preciziafuncţiei pentru colectarea datelorestedeaproximativ98%.

26UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

► Sistemul Real-Time PCR - RotorGene-Corbett 6200 HRM

UnitateaHRMcaracterizeazăampliconiipebazaparametrilordedisociere(melt-ing)printr-otehnicăsimilarăanalizeicurbelordetopiredaroferindmultmaimulteinformaţiişiavândnumeroaseaplicaţii.Încadrullaboratoarelornoastresistemulesteutilizatpentruevaluareaexpresieigeniceîndiferitepatologii,genotipareşidetecţiaagenţilorpatogeni.DeasemeneaReal-TimePCRtermociclerulpoatefifolositpentrudetectareagraduluidemetilareADN,scanaregenicăşicercetăriasupramiARN.

► Extractor automat - Maxwell® 16 & Biofotometru Eppendorf

Echipamentulesteprevăzutcuafişajdigitalpentruprezentareaprotocoalelordelu-cruşiadesfăşurăriiparametrilorprogramaţi.EsteposibilăizolareaADN,ARNşiproteinedinoricetipdeprobă(sânge,ţesut)şioricetipdespecie(animal,vegetal,bacterian).

► Omogenizatoare de țesut Mikro-dismembrator (Sartorius) & Heidolph Silent Crusher S

Avândînvederecăanalizacompletăaacizilornucleiciimplică,înmultecazuri,oetapăiniţialădeomogenizareDepartamentuldeGeneticăMolecularădispunedeomoarăcubile–Mikro-dismembrator (Sartorius) şiunomogenizatorHeidolphSilentCrusherS.AcestesistemepermitomogenizarearapidăaprobelorîncondiţiilereduceriirisculuidegradăriiADN,ARNşiproteinelor.Înplusesteevitatăutilizareaunorenzime,metodăutilizatăfrecventînlizacelulară.

► Sistem de fotodocumentare G:Box Chemi HR (Syngene)

Caracteristici:

► Capacitate de evaluare a greutăţii moleculare, adensităţiiopticeşiaintensităţiiproteinelorşiaacizilornucleici

► Capacitate de detecţie a probelor fluorescente,chemiluminscentesaucromogenice

►Transiluminareşiepi-iluminareatâtpentruutilizarealuminiialbecâtşiultraviolete(UV)

► Capacitate de analiză cantitativă a imaginii de laniveldepicomol la femtomolpegeluri şibloturi cusenzitivitateegalăcuautoradiografia.

27UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

LABORATOR DE CULTURI CELULARE ŞI CITOGENETICĂ

Laboratorul de culturi celulare conţineechipamente moderne care permit ogamă variată de experimente: iniţiereade culturi celulare primare, cultivarea şimenţinereaunorliniicelulare,caracteriza-reamorfologicăşibiochimicăacelulelor;studiereamecanismelorsenescenteişiapo-ptozeicelulare;caracterizarearăspunsuluicelular; testarea efectului unor substanţechimiceînculturidecelule.

Echipamente: hotamicrobiologică clasa II de siguranţa (BioActivaAquaria), hotă cufluxlaminarverticalclasaIIIBiohazard(Aquaria),centrifugişimicrocentrifugi(Hettich),microscop inversat cu fluorescenţa cu cameră foto conectată la calculator (OlympusCKX41), balanţă (Kern), incubator cu CO2 (Sanyo), termostat (Raypa),microscop optic(Nikon),baiedeapă(Raypa),criolocator,frigidere.

Laboratorul de citogenetică estedotatcuechipamentedeultimageneraţiecarepermit: ►identificareasimultanăîntr-unsingurtestamaimultormodificăricromozomiale(Wholegenomescanning),evaluându-seastfelsutederegiuniasociatecumultipleanomalii, ►rezoluţieextremdeînaltă,identificândanomaliisubmicroscopice; ►sistemulmicroarrayîmpreunăcusistemuldecariotiparestandardacoperăcaariedeinvestigareîntregulgenom(toţicromozomii,delanivelulmicroscopicpânălapolimorfismemononucleotidice), ►princombinareatehniciiarrayCGHcucari-otipareastandardpotfiidentificateinclusivinversiileşitranslocaţiileechilibrate;

28UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

►identificarearapidăasitusurilorprecisedelegareaproteinelorcaracteristiceADN—factoridetranscripţie,histone,polimeraze-dingenomulţintă,metilareaADN,studiulexpresieigenice ►accesareaunorbazededatededicateprinprogramespecifice.Principalele echipamente: ►LiniemicroarraycompletaNimblegen-RochepentruCGH,CGX,chromatinimmuneprecipi-tationonChIP-chipCGS Descriere generală ►Scanerculaserdemaresensibilitate,deachiziţieadatelordefluorescenţăpe2canaledefluorescenţăşiprocesarecompletautomatăaimaginilor.Rezoluţiaesteflexibilă,limitadesensibilitateestede2microni.Scaner-ulesteînsoţitdeprogramepentruvizualizareadatelor,darşiunprogramceproceseazădateleîntimpreal. ►Sistemdehibridizarecu4moduledestinaterealizăriicondiţiilorreproductibiledehibridizaresubcontrolprecisdetemperaturăşiagitareactivă. ►Mixerelemenţinpepoziţieşiagităactivlamelearrayspeduratahibridizării,învedereacreşteriisemnaluluişiaspecificităţii. ►Uscătordemicroarrayspentruimaginidemarecalitatecufondrezidualminim,necesareCGHşianalizaexpresieigenice. ►Sistemulesteprevăzutcuautoîncărcătorautomatde48delame,cititorcucoddebare,auto-focalizareşiautoachiziţie,pentruconfiguraţiecompletneasistată. ►Sistemcompletcariotiparestan-dardcarecuprinde:microscopopticAxioImager.A2,camerăvideo AxioCam,staţiegraficăHp,softwareachiziţieşiprelucrareimagini.

29UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

LABORATOR DE IMAGISTICĂ PRIN REZONANŢĂ MAGNETICĂ (MRI)

Imagistica prin rezonanţă magneticătransformă algoritmul diagnostic prinsensibilitatea sa în studiul ţesuturilormoinormaleşipatologice.

Metoda se bazează pe propri-etatea protonilor deH+ plasaţi într-un câmpmagnetic puternic (0,2-1,5T) şi excitaţiprintr-oundăderadiofrecvenţădeaemiteunsemnal,careestetratatinformaticşicon-vertitînimagine.Formareaimaginiipresupuneachiziţiadedateşirespectiv,reconstrucţia.

Preţulunuiexamenprinrezonanţămagneticădepindedeintensitateacâmpuluimagneticalaparatului.Câmpulmagneticde3TesteutilînIRMfuncţionalşispectros-copie,darestefoartescumpşirămâneîncădedomeniulcercetării.

IRMesteesteutil înstudiulmorfologicdarşifuncţional(analizafuncţiilorcer-ebrale,difuzieişiperfuzieitisulare).

30UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

COMPARTIMENT IMAGISTICĂ

Imagisticaprinrezonanţămagneticăareşiînpatologiaorganelorab-dominaleşipelvinenumeroaseavan-tajeîncomparaţiecutomografiacomputerizată:

►esteceamaisensibilămetodădedi-agnosticînbilanţulleziunilorhepaticedifuze

►caracterizeazăşidiferenţiazăcorectîntreoleziunebenignăşiunamalignădinsferaabdominală/pelvină,prinutilizareasubstanţelordecontrastcu

specificitatecelulară(hepatocitarăsaupentruceluleleKupffer).

►colangiopancreatografiaprinRMpermiteexplorareadeomanierăneinvazivăacăilorbiliareşipancreatice.

Examinareaprinrezonanţămagneticăare,însă,şicontraindicaţii absolute,vala-bileîncazuloricăruicorpstrăinmetalicintrodusînorganism: ►pacemakercardiac ►implantecohleare ►anumiteprotezevalvulare cardiace ►stimulatoaredecreştereosoasă ►clipurilesaucoilurilepentru anevrismelearteriale

Contraindicaţii relativealeexplorăriiprinrezonanţămagnetică: ►pacienţiintensfebrilicărorainvestigaţiapoatesălecreascăşimaimulttemperaturacorpului ►pacienţinecooperanţi, ►pacienţicomatoşi ►pacienţicumişcărinecontrolate ►pacienţiclaustrofobi ►femeigravideînprimultrimestrudesarcină.

31UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

LABORATOR DE IMAGISTICĂ DE FUZIUNE (PET-CT)

Tomografiacomputerizataprinemisiedepoz-itroni(PET/CT)este,laoraactuală,unicatehnicăimagisticămedicalăcarefurnizeazăinformaţiifuncţionaleasupradiferitelorprocesemetabolicealeorganismului.Acesteinformaţiisuntobţinute

prinstudiuldistribuţieispaţialearadiofarmaceuticuluiinjectat.

Principiul metodei:

Substanţautilizatăesteomoleculădeglucoză(FDG)marcatăprintr-unizotopradioactiv(18F),care,dupăinjectare,sedistribuieîntotcorpulşi,prinintermediulei,primiminformaţiireferitoarelaconsumuldezahărdinţesutuluman.Cantitateamol-eculelorFDGadministrateunuipacientesteatâtderedusăîncâtnuproduceniciunefectînorganism. Tomografiacomputerizatăprinemisiedepozitroniesteotehnicăimagisticăindicatăîndeosebiîndomeniuloncologieimedicale,pentru: ►diagnosticprecocetumoral ►stadializare(canceresofagian,gastric,colo-rectal,hepatic,pancreatic,tumoriendocrine) ►identificarearecurenţelortumoralepostterapeutice ►evaluareposttratamentchirurgical,chimioterapiesau/şiradioterapie Ţesutultumoralestediagnosticatimagisticcumaresensibilitateşispecificitate;localizatanatomiccumareprecizieşirezoluţie.Regiunidificildeevaluatimagistic(regiu-neacervicală,mediastinul,abdomenulpostchirurgical)potfiexaminatecumareacurateţe.ExaminareaPET/CTfaceposibilădetectareaunorfocaretumoralemicide2-3mm,încareacumulareaFDGestedecâtevaorimaimaredecâtîncazulţesuturilorsănătoaseînveci-nate.AvantajulcelmaimarealexamenelorPET/CTestepreciziacucaresestabileştestadiulbolii,stadializareacumaresensibilitateatumorilor,permiţândidentificareatuturorlocalizărilortumoriiînaceeaşiexaminare.Acestrezultat,fărăexamenulPET/CTsepoateobţinedoarprinintermediulanumeroasealtemetodededignostic,uneleinvazive:US,Rtg,CT,RM,examenendoscopic,biopsie.ExaminareaPET/CTestefoarteutilăînstabilirealocu-luideluareabiopsiei,evidenţiindloculundeţesutultumoralesteviabilşicumetabolismactiv.Acestaspectestedeosebitdeimportantîncazultumorilorcerebrale,limfoamelor,determinărilorsecundarepulmonaremultiple. ExaminareaPET/CTfaceposibilăevaluareatimpurieaeficienţeitratamentuluioncologic,deoarecemetabolismulţesutuluitumoriicarereacţioneazăcorespunzătorlatratamentscadeconsiderabilfaţădeţesuturilecureacţienecorespunzătoare.Prinevaluaretimpuriesepoaterenunţalaterapiainutilăşisepoatealegeoschemăalternativădetratament.Deasemenea,sepoatedepistadacă,ulteriortratamentului,nuaurămastumoriviabileînorganism.

32UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova

LABORATOR DE RADIOLOGIE DIGITALĂ ȘI ENDOSCOPIE INTERVENŢIONALĂ (DRX)

LaboratoruldeRadiologiedigitalăşiendoscopieintervenţionalăestedotatcusistememodernederadiologie(Siemens)şiendoscopie(Olympus)caresăpermitărealizareamaimultortipurideproceduri.Colangiopancreatografiaendoscopică

retrogradă(ERCP)esteotehnicăcecombinăendoscopiaşifluoroscopiaîntimpulaceleiaşiproceduri.IniţialERCPafostfolositămaimultcametodădediagnosticşimaipuţinînscopterapeutic,însădezvoltareaextensivăauneivarietăţideaccesoriiendoscopicealărgitaplicaţiilesale.ERCPreprezintăoprocedurăcenecesităantrena-mentşiexperienţăconsiderabilăpentruaputeafifolosităeficientşiîncondiţiidesiguranţă.OdatăcuefectuareaprimeiERCP,iardupăimplementareapapilosfincter-otomieiendoscopiceretrogradecagestterapeuticdefinitiv,decompresiepreopera-torie,manevrăînainteamontăriidestenturibilio-pancreaticesauefectuatăînscopulextracţieidecalculibiliaris-auconturatnoiperspectiveîndiagnosticareaşitrata-mentulobstrucţiilorzoneibiliopancreatice. PreciziadiagnosticălafelcaşirandamentulterapeuticalERCPauduslaocreştereconsiderabilăinultimiianialnumăruluiacestuitipdeintervenţii.ActualERCPesteutilizatînprincipalpentruadiagnosticaşitratapatologiaductelorbiliaresaupancreatice,incluzândlitiazăbiliară,stricturişistenozeinflamatoriisaumaligne,fistuleetc.Plasareaendoscopicăsubcontrolradiologicdestenturiesteutilizatăpali-ativcusuccespentruatrataobstrucţiilemalignesaubenigneladiverseniveluripetractuldigestiv.Acesteobstrucţiipotfirezultatulcreşteriiuneitumorigastro-intesti-naleprimarecaresăinvadezelumenulsauuneitumoridevecinătatecaresăproducăcompresieextrinsecă.Impactulclinicalaplicăriidestenturidigestiveestemajorpermiţându-ipacientuluisăingerealimenteîncazuluneitumoristenozanteesofag-ienesaupermitevitareauneiocluziiintestinaleîncazuluneitumoricolorectale.

33UMFCraiova

Centrul de Cercetare în Gastroenterologie şi Hepatologie

CENTRUL DE CERCETARE ÎN GASTROENTEROLOGIE

ŞI HEPATOLOGIE, UMF CRAIOVA

BDUL 1 MAI NR. 66 – 68, 200638, CRAIOVA – DOLJ TEL/FAX: 0251/310.287;

TEL. PROGRAMÃRI: 0727.088.767 WWW.TARGET.UMFCV.RO

34UMFCraiova

Universitatea de Medicină şi Farmacie din Craiova